87.7. судебно-химическое исследование объектов должно быть начато в день их поступления, учитывая возможность летучести и разложения некоторых веществ (органические растворители, кислоты, щелочи, синильная кислота, кокаин и др.);
87.8. для проведения судебно-химического исследования (обнаружение, применение подтверждающих методов, количественное определение) расходуют две трети присланных объектов и одну треть хранят в отделении (архив) для проведения повторного анализа (если возникает такая необходимость).
При получении ограниченного количества объектов они могут быть израсходованы полностью по согласованию с органом или лицом, назначившим экспертное исследование;
87.9. проведение судебно-химического анализа:
87.9.1. для обнаружения и идентификации химических и лекарственных веществ применяются предварительные методы (цветные реакции, тонкослойная хроматография, иммуноферментные методы) и подтверждающие инструментальные (спектрофотометрия в видимой, ультрафиолетовой и инфракрасной областях, атомно-абсорбционная спектрофотометрия, газожидкостная хроматография, высокоэффективная жидкостная хроматография, хроматомасс-спектрометрия);
87.9.2. исследование может быть произведено на определенное соединение, группу веществ или на неизвестное вещество по схеме общего судебно-химического анализа в зависимости от вопросов, поставленных в сопроводительном документе;
87.9.3. в зависимости от поставленных задач разрабатывают соответствующую схему анализа. По возможности должно быть применено не менее двух независимых методов, причем каждый из них должен быть основан на различных физических или химических принципах;
87.9.4. объекты (ткани) для всех исследований берут по массе, количеству биожидкостей, дистиллятов, диализатов, объему фильтратов. Количественное определение производят во всех случаях, когда имеются соответствующие методики определения и результаты возможно интерпретировать. Количество найденных веществ относится к 1 кг взятого для анализа объекта и выражается в весовых единицах;
87.9.5. все методы количественного определения должны быть апробированы на той биологической матрице, которая будет использоваться для анализа (кровь, моча, ткани органов), к которой добавляют заведомо известное количество вещества и подвергают исследованию по данной схеме анализа. При этом определяют пределы обнаружения и определения, абсолютный выход при различных концентрациях, диапазон определяемых содержаний по калибровочному графику (подчинение закону Ламберта-Бера), селективность и воспроизводимость анализа. Для повышения точности определения обнаруживаемого вещества проводят не менее двух определений для каждого объекта;
87.9.6. следует убедиться в химической чистоте используемых для анализа реактивов; при этом на чистоту реактивы проверяют в тех максимальных количествах, в которых они будут употреблены для анализа, и теми же методами и реакциями, которые будут применены в ходе судебно-химического исследования;
87.9.7. для обеспечения высокого качества проведения экспертного исследования рекомендуется производить внутрилабораторный и внешний контроль качества, ориентированный как на метод, так и на определяемое вещество;
87.10. в целях единого подхода к учету экспертной работы в структурных подразделениях бюро судебно-медицинской экспертизы применяют коэффициенты пересчета судебно-химических исследований на полные анализы (условные единицы учета).
88. Особенности порядка производства биохимической экспертизы:
88.1. экспертные биохимические исследования проводятся в соответствующем структурном подразделении ГСЭУ, задачами которого являются:
выполнение исследований, требующих специальных познаний в области применения биохимических методов анализа органов, тканей и жидкостей из трупа для решения специальных вопросов, возникающих при его судебно-медицинском исследовании;
определение количественного содержания некоторых имеющих судебно-медицинское значение биохимических показателей с целью установления причины смерти;
освоение и внедрение новых качественных и количественных биохимических методов анализа, адаптированных к задачам судебно-медицинской практики, с целью расширения диагностических возможностей проводимых экспертных исследований;
88.2. для соблюдения мер предосторожности при направлении на судебно-биохимическое исследование объектов из инфицированных трупов (туберкулез, гепатит, СПИД и др.) на упаковке должны быть особые отметки;
88.3. объектами исследования могут являться биологические жидкости, органы и ткани трупа.
Взятие и направление указанных объектов проводят в соответствии с методикой для каждого вида исследования:
88.3.1. взятие крови производят сухим шприцем из бедренной вены трупа в стерильную склянку (например, из-под пенициллина и др.), которую заполняют доверху. Кровь из трупа необходимо брать не позднее первых 24 часов после наступления смерти и направлять сразу же на биохимическое исследование.
При невозможности направить кровь на анализ сразу после ее взятия кровь можно хранить в холодильнике при температуре 4 - 8°С в течение 10 суток (биохимические показатели стабильны при хранении крови в холодильнике в герметически закупоренной посуде). Следует избегать контакта крови с водой и мокрым инструментом; не следует допускать замораживание крови в морозильной камере;
88.3.2. для определения гликолизированного гемоглобина, метгемоглобина, фибриногена и продуктов деградации фибрина (ПДФ) необходимо направлять цельную кровь;
88.3.3. на биохимическое исследование для определения гликогена направляют кусочки ткани размерами 2,0-3,0 x 3,0-4,0 см, взятые из:
стенки левого желудочка сердца по средней линии, проходящей между коронарной бороздой и верхушкой сердца;
большой грудной или подвздошной мышцы;
правой доли печени около круглой связки на глубине не менее 2,0-3,0 см от поверхности, не содержащие крупных и средних желчных протоков.
Кусочки ткани в отдельных маркированных флаконах помещают в морозильную камеру;
88.3.4. при диагностике скоропостижной смерти от ишемической болезни сердца берут не менее 7 кусочков миокарда из левого желудочка и межжелудочковой перегородки (боковой стенки левого желудочка, верхушки левого желудочка, передней стенки левого желудочка, задней стенки левого желудочка, передней сосочковой мышцы, задней сосочковой мышцы, межжелудочковой перегородки). Навески очищают от эпикарда, эндокарда и соединительнотканных прослоек. Биологический материал помещают во флаконы, плотно укупоривают и маркируют;
88.3.5. для дифференциальной диагностики прижизненных и посмертных повреждений:
исследуют кровоизлияния в подкожном жире на гемин;
изымают кровоподтечную или осадненную кожу, часть странгуляционной борозды, раны с подкожной жировой клетчаткой в количестве 2,0-3,0 г из центральной части кровоподтека или осаднения;
участки поврежденной кожи изымают с подкожной клетчаткой в количестве 2,0-3,0 г;
если кровоподтек очень мал, то его берут полностью.
В качестве контроля иссекают участки неповрежденной кожи, симметричные относительно продольной оси тела или близлежащие. Материал помещают в чистые склянки, маркируют и направляют на исследование. Недопустим контакт исследуемых объектов с водой и другими жидкостями;
88.3.6. при нозологических формах, наиболее часто встречающихся в судебно-медицинской практике, исследуют следующие биохимические показатели:
при подозрении на смерть от диабета, гипергликемической комы - концентрации глюкозы, гликолизированного гемоглобина, креатинина;
при подозрении на отравление неустановленным ядом - активность холинэстеразы, глутаматдегидрогеназы, трансаминаз, глутамилтранспептидазы, мочевины, креатинина, глюкозы;
при подозрении на смерть в результате переохлаждения организма - концентрации глюкозы и гликогена;
при подозрении на смерть вследствие почечной недостаточности - концентрации мочевины, креатинина, средних молекул;
при подозрении на смерть от ишемической болезни сердца - концентрации ионов калия и натрия, активность аспарагиновой и аланиновой трансаминаз (ACT и АЛТ), тропонина Т, лактатдегидрогеназы (ЛДГ);
с целью дифференциальной диагностики прижизненных и посмертных повреждений - концентрацию гемина;
для определения времени образования гематом - концентрацию метгемоглобина;
при подозрении на смерть от отравления окисью углерода - концентрацию карбоксигемоглобина;
88.4. исследование объектов должно быть начато в день их поступления.
С учетом неустойчивости и изменчивости первоначальных свойств биологических объектов эксперт определяет рациональную очередность их исследования и использования конкретных методов анализа. В зависимости от поставленных задач эксперт определяет способы и средства их решения.
Объекты хранят в холодильнике или морозильной камере. По окончании экспертного исследования их сохраняют в течение 10 суток в морозильной камере при условии взятия материала в течение 24 часов после момента смерти.
88.5. при оформлении результатов экспертного исследования подробно характеризуют объекты исследования, описывают методики и излагают результаты судебно-биохимического анализа.
В выводах дают количественную характеристику биохимических показателей по отношению к норме по исследованной методике.