В хроматографическую камеру за 1 ч до начала хроматографирования заливают смесь подвижных растворителей для насыщения ее парами. Объем подвижного растворителя в камере должен находиться на высоте не более чем 0,5 см от уровня дна.
4.3.6 Приготовление основных растворов пестицидов с массовой концентрацией 100 мкг/см
Для приготовления основного раствора любого пестицида 10 мг эталонного препарата растворяют гексаном в мерной колбе вместимостью 100 см и доводят гексаном до метки. Хранят основные растворы в колбах с притертой пробкой в холодильнике в течение 6 мес.
и доводят гексаном до метки. Хранят основные растворы в колбах с притертой пробкой в холодильнике в течение 6 мес. 4.3.7 Подготовка пластин "Силуфол" для хроматографирования
Пластины "Силуфол" перед употреблением промывают. Для этого в хроматографическую камеру наливают систему растворителей ацетон-аммиак (1:1) на высоту 5-7 мм и помещают туда пластинки в вертикальном положении. После того, как линия фронта подвижного растворителя поднимется, не доходя 10 мм до верха пластинки, ее вынимают, высушивают на воздухе, затем активируют в сушильном шкафу при температуре 110 °С в течение 30-60 мин. Перед употреблением с вертикальных сторон пластинки удаляют слой в 3 мм, что способствует выравниванию фронта растворителя.
4.4 Проведение анализа
4.4.1 Из объединенной пробы продукта отбирают навеску массой 50,0 г, помещают в коническую колбу с притертой пробкой вместимостью 250 см и заливают 100 см этилацетата. Содержимое колбы перемешивают в течение 20 мин на аппарате для встряхивания.
и заливают 100 см этилацетата. Содержимое колбы перемешивают в течение 20 мин на аппарате для встряхивания. Экстракт декантируют в круглодонную колбу, пропуская через слой безводного сернокислого натрия. Эту операцию повторяют еще 2 раза. Экстракт объединяют и концентрируют с помощью ротационного испарителя досуха при температуре водяной бани 40-45 °С.
4.4.2 Очистка экстракта
Сухой остаток количественно переносят с помощью 5 см гексана в делительную воронку вместимостью 100 см , добавляют 5 см концентрированной серной кислоты и содержимое воронки осторожно встряхивают 5-10 раз. После разделения слоев нижний слой сливают и отбрасывают. Очистку экстракта повторяют еще несколько раз. Очищенный экстракт промывают дважды раствором бикарбоната натрия с массовой долей 1% порциями по 5 см , а затем дистиллированной водой до нейтральной реакции промывных вод. Гексановый раствор количественно переносят в колбу грушевидной формы вместимостью 25 см и отгоняют на ротационном испарителе при температуре водяной бани 40-45 °С.
гексана в делительную воронку вместимостью 100 см , добавляют 5 см концентрированной серной кислоты и содержимое воронки осторожно встряхивают 5-10 раз. После разделения слоев нижний слой сливают и отбрасывают. Очистку экстракта повторяют еще несколько раз. Очищенный экстракт промывают дважды раствором бикарбоната натрия с массовой долей 1% порциями по 5 см , а затем дистиллированной водой до нейтральной реакции промывных вод. Гексановый раствор количественно переносят в колбу грушевидной формы вместимостью 25 см и отгоняют на ротационном испарителе при температуре водяной бани 40-45 °С. 4.4.3 Если анализируют объекты, содержащие жир, то полученный по 4.4.2 экстракт подвергают дополнительной очистке на колонке. Сухой остаток растворяют в 10 см гексана, переносят на колонку, подготовленную по 4.3.3, и элюируют пестициды с помощью 110 см смеси бензола с гексаном в соотношении 4:7 со скоростью одна капля в секунду. Элюат обезвоживают, пропуская через слой безводного сернокислого натрия и отгоняют растворитель досуха.
гексана, переносят на колонку, подготовленную по 4.3.3, и элюируют пестициды с помощью 110 см смеси бензола с гексаном в соотношении 4:7 со скоростью одна капля в секунду. Элюат обезвоживают, пропуская через слой безводного сернокислого натрия и отгоняют растворитель досуха. 4.4.4 Для очистки экстракта от восков сухой остаток, полученный по 4.4.1, растворяют охлажденной смесью ацетона и воды в соотношении 2:1 и выдерживают 30 мин в холодильнике. Воски отфильтровывают через бумажный фильтр, который промывают охлажденной смесью ацетона и воды 2:1. Пестициды экстрагируют из водно-ацетонового раствора гексаном. Растворитель упаривают.
4.4.5 Сухой очищенный остаток растворяют в колбе, внося пипеткой 1 см гексана. 0,1 см полученного раствора наносят микропипеткой или шприцем на хроматографическую пластинку на линию старта, находящуюся от края на расстоянии 1,0 см. Для увеличения чувствительности метода сухой остаток растворяют в нескольких каплях гексана и полностью наносят на пластинку. Справа и слева от пробы наносят стандартные растворы пестицидов, содержащие 1, 2, 4, 5, 10 мкг препарата.
гексана. 0,1 см полученного раствора наносят микропипеткой или шприцем на хроматографическую пластинку на линию старта, находящуюся от края на расстоянии 1,0 см. Для увеличения чувствительности метода сухой остаток растворяют в нескольких каплях гексана и полностью наносят на пластинку. Справа и слева от пробы наносят стандартные растворы пестицидов, содержащие 1, 2, 4, 5, 10 мкг препарата. После нанесения пробы на пластинку "Силуфол" ее помещают в хроматографическую камеру с подвижным растворителем (N 1) - гексан-ацетон (6:1) или (N 2) - гексан (таблица 1). После того, как фронт растворителя поднимется по пластинке, ее вынимают из камеры, обрабатывают проявляющим реактивом и подвергают УФ-облучению в течение 5-10 мин лампой типа ПРК-4. Пластины располагают на расстоянии 20 см от источника света.
При отсутствии пластин "Силуфол" можно использовать пластины "Сорбфил" отечественного производства, с системой подвижных растворителей ацетонитрил-вода (2:1) (таблица 1).
При наличии хлорорганических пестицидов при описанных выше условиях на пластинах проявляются пятна серо-черного цвета на светлом фоне. По значениям соответствующих 
определяют, какие пестициды присутствуют в продукте (таблица 1).
определяют, какие пестициды присутствуют в продукте (таблица 1). Таблица 1 - Ориентировочные значения пестицидов в различных системах растворителей
пестицидов в различных системах растворителей| Наименование пестицидов | Система растворителей | ||
| N 1 гексан-ацетон (6:1) | N 2 гексан | ацетонитрил-вода (2:1) | |
| значение на пластинках "Силуфол" | значение на пластинках "Сорбфил" | ||
| Кельтан | 0,15 | 0,05 | 0,21 |
| Гамма-ГХЦГ | 0,23 | 0,15 | 0,30 |
| 4,4'-ДДД | 0,32 | 0,37 | 0,42 |
| Гептахлор | 0,57 | 0,45 | 0,73 |
| 4,4'-ДДЭ | 0,61 | 0,45 | 0,70 |
| Альдрин | 0,70 | 0,82 | 0,80 |
| 4,4'-ДДТ | 0,78 | 0,67 | 0,85 |
4.5 Обработка результатов
4.5.1 Измерение содержания пестицидов проводят путем сопоставления площади пятна испытуемого экстракта и площади пятна рабочего стандартного раствора, наиболее близкого по интенсивности окраски к пятну экстракта. Площади пятен измеряют с помощью линейки или шаблона из миллиметровой бумаги. Содержание пестицидов 
, мг/кг, вычисляют по формуле
, мг/кг, вычисляют по формуле
, (1) где 
- масса пестицида в 1 см стандартного раствора, мкг;
- масса пестицида в 1 см стандартного раствора, мкг;
- масса навески исследуемого продукта, г;
- площадь пятна, полученного при нанесении испытуемого экстракта, мм
;
- площадь пятна, полученного при нанесении стандартного раствора, мм ;
- объем экстракта, в котором перерастворен сухой остаток, см ;
- объем исследуемого экстракта, нанесенного на пластинку, см . При нанесении всей пробы 
.
. 4.5.2 Вычисления проводят до первого десятичного знака. Окончательный результат округляют до целого числа.
4.5.3 За окончательный результат испытаний принимают среднеарифметическое значение результатов (
) двух параллельных определений, расхождение между которыми не должно превышать 30% по отношению к среднеарифметическому значению при 
0,95.
) двух параллельных определений, расхождение между которыми не должно превышать 30% по отношению к среднеарифметическому значению при 0,95. 4.5.4 Пределы возможных значений систематической составляющей погрешности измерений содержания пестицидов любой пробы при допускаемых методом изменениях влияющих факторов ±0,15 .
. 4.5.5 Минимально обнаруживаемое содержание пестицидов в хроматографируемой пробе 1 мкг.
4.5.6 Значение среднеквадратичного отклонения случайной составляющей погрешности измерений содержания пестицидов одной и той же пробы при допускаемых методом изменениях влияющих факторов составляет 0,2 .
. 4.5.7 При измерении содержания пестицидов в овощах и фруктах, соках, компотах, пюре полнота обнаружения варьирует в пределах: для гамма-ГХЦГ - 75-80%, кельтана - 75-85%, альдрина - 72-80%, 4,4'-ДДТ - 76-90%, 4,4'-ДДД - 75-85%, 4,4'-ДДЭ - 70%.
5 Метод газожидкостной хроматографии
5.1 Сущность метода
Метод основан на экстракции пестицидов этилацетатом, очистке экстракта концентрированной серной кислотой или силикагелем АСК с последующим анализом хлорорганических пестицидов на газовом хроматографе с детектором захвата электронов.
Метод предназначен для анализа остаточных количеств пестицидов альфа-, бета-, гамма-ГХЦГ, кельтана, альдрина, гептахлора, ДДТ и его метаболитов.
Газохроматографический метод используют при возникновении разногласий в оценке результатов.
5.2 Аппаратура, материалы и реактивы
При проведении испытания применяют аппаратуру, материалы и реактивы по 2.2 со следующим дополнением:
Газовый хроматограф Газохром 1109 или аналогичный с детектором захвата электронов.
Микрошприц МШ 10.
Колонки хроматографические стеклянные для газового хроматографа длиной 1,0 м, диаметром 3 мм и длиной 1,5 м, диаметром 3 мм.
Баллон стальной по ГОСТ 949.
Азот газообразный по ГОСТ 9293, марки "особой чистоты" или азота с содержанием кислорода не более 0,004%.
Насадки для колонки: 5% OV-17 на хроматоне N-AW-DMCS (0,16-0,20 мм), 3% OV-210 на хроматоне N-супер (0,125-0,16 мм) или 5% SE-30 на хроматоне N-AW-DMCS (0,16-0,20 мм).
5.3 Подготовка к анализу
5.3.1 Очистка силикагеля АСК - по ГОСТ 4.3.1.
5.3.2 Очистка ваты - по 4.3.2.