- РНК вирусов гепатита А, ротавирусов, энтеровирусов и ДНК аденовирусов методом полимеразной цепной реакции со стадией обратной транскрипции (ОТ-ПЦР) для РНК-содержащих вирусов;
- колифаги (исследования проводят бактериологические лаборатории) в качестве косвенных показателей вирусного загрязнения вод различного назначения в соответствии с нормативными и методическими документами.
Выбор показателей осуществляют в соответствии с нормативными и методическими документами или по рекомендациям эпидемиолога.
2.4. Оценка эпидемической безопасности водных объектов
Вода водных объектов и питьевая вода подлежит обязательному санитарно-вирусологическому контролю.
Основным принципом регламентирования вирусного загрязнения воды на настоящем этапе является отсутствие возбудителей кишечных вирусных инфекций в нормируемом объеме воды водных объектов и питьевой воде.
Критерием эпидемической безопасности воды водных объектов является отсутствие спорадической и вспышечной заболеваемости населения, обусловленной кишечными вирусами, распространяющимися водным путем.
Санитарно-вирусологический контроль воды осуществляют в соответствии с положениями раздела 2 с использованием санитарно-показательных микроорганизмов - колифагов, косвенных показателей вирусного загрязнения, что является экономичным и дает быстрый ответ о потенциальной эпидемической опасности водных объектов в отношении вирусного загрязнения и риска заболевания населения вирусными кишечными антропонозами.
В соответствии с результатами исследований воды на колифаги проводят обязательное прямое определение энтеровирусов и аденовирусов с использованием "культуральных" методов.
Для выявления в пробах воды труднокультивируемых в клеточных культурах вирусов (вирус гепатита А, ротавирусы) проводят анализ воды на наличие их антигенов с использованием методов ИФА, или ОТ-ПЦР - на наличие РНК вирусов. Положительный результат анализа пробы воды в ИФА после обеззараживания хлором или озоном, содержащей только антиген или РНК определенного вируса, оценивают как ориентировочный, свидетельствующий о циркуляции данного возбудителя на изучаемой территории и возможного водного пути передачи в реализации эпидемического процесса данной инфекции.
Наличие в анализируемой пробе помимо антигена или РНК вируса других форм микроорганизмов (общее микробное число - ОМЧ, колиформных бактерий, колифагов) свидетельствует о вирусном загрязнении воды.
Подтверждением этому является развитие соответствующей эпидемической ситуации на изучаемой территории, а также гомологичность РНК вирусов, выделенных из воды и из материалов от больных.
Для получения информации о степени гомологии штаммов вирусов, выделенных из воды и из материалов от больных на исследуемой территории, проводят ПЦР-амплификацию вариабельного фрагмента генома вируса с последующим секвенированием. Полная гомология данных фрагментов генома свидетельствует в пользу водного пути распространения возбудителя, тогда как наличие генетических отличий исключает роль водного фактора в возникновении данной эпидемической вспышки (эти исследования выполняют в специализированных лабораториях, имеющих разрешение на данный вид деятельности в установленном законодательством Российской Федерации порядке).
Таблица 1
Объем проб, условия и периодичность отбора проб воды водных объектов на вирусологический анализ
┌─────┬───────────┬────────────────────────────────────────┬────────────┐
│N п/п│Вид водного│ Объем исследуемой воды, показания к │ Методы │
│ │ объекта │ проведению и кратность анализа при │концентриро-│
│ │ │ контроле: │ вания │
│ │ ├──────────┬─────────┬─────────┬─────────┤ │
│ │ │ плановом │внеплано-│внеплано-│производ-│ │
│ │ │ │вом - по │ вом - │ственном │ │
│ │ │ │экстрен- │посанита-│ - в │ │
│ │ │ │ ным │рно-эпи- │соответс-│ │
│ │ │ │показани-│демичес- │ твии с │ │
│ │ │ │ ям │ ким │ рабочей │ │
│ │ │ │ │показани-│програм- │ │
│ │ │ │ │ ям, по │ мой │ │
│ │ │ │ │согласо- │ │ │
│ │ │ │ │ ванию с │ │ │
│ │ │ │ │ ТУ │ │ │
│ │ │ │ │Роспотре-│ │ │
│ │ │ │ │бнадзора │ │ │
├─────┼───────────┼──────────┼─────────┼─────────┼─────────┼────────────┤
│ 1 │Чистая │10 л - 1│10-50 л │10 и│10-50 л │Ионообменная│
│ │вода: │раз в│ │1000 л │ │смола. │
│ │а) питьевая│квартал │ │ │ │Мембранная. │
│ ├───────────┼──────────┼─────────┼─────────┼─────────┤Фильтрация. │
│ │б) подзем- │10 л - 1│10-50 л │10 и│10-50 л │Двуххтапный │
│ │ных │раз в│ │1000 л │ │метод. │
│ │источников │квартал │ │ │ │Ловушечное │
│ ├───────────┼──────────┼─────────┼─────────┼─────────┤устройство │
│ │в) плавате-│по │10-50 л │10 и│10-50 л │ │
│ │льных │согласова-│ │1000 л │ │ │
│ │бассейнов │нию с ТУ│ │ │ │ │
│ │ │Роспотреб-│ │ │ │ │
│ │ │надзора │ │ │ │ │
├─────┼───────────┼──────────┼─────────┼─────────┼─────────┼────────────┤
│ 2 │Вода │10 л - 1│10 л │10 л │10 л │Адсорбцион- │
│ │поверхност-│раз в│ │ │ │ный метод│
│ │ных │квартал │ │ │ │(МПС). │
│ │водоемов: │ │ │ │ │Ионообменная│
│ │а) источник│ │ │ │ │смола. │
│ │водоснабже-│ │ │ │ │Мембранная. │
│ │ния │ │ │ │ │Фильтрация. │
│ ├───────────┼──────────┼─────────┼─────────┼─────────┤Двухэтапный │
│ │б) рекреа- │1 раз в│ │ │ │метод │
│ │ционные │месяц, с│ │ │ │ │
│ │воды │мая по│ │ │ │ │
│ │ │сентябрь │ │ │ │ │
├─────┼───────────┼──────────┼─────────┼─────────┼─────────┼────────────┤
│ 3 │Сточные │1 л - 1│1-5 л │1-5 л │1-5 л │Двухфазный │
│ │воды после│раз в│ │ │ │метод. │
│ │очистки и│месяц в│ │ │ │Адсорбцион- │
│ │обеззаражи-│контроль- │ │ │ │ный метод│
│ │вания │ном створе│ │ │ │(МПС). │
│ │ │ │ │ │ │Ионообменная│
│ │ │ │ │ │ │смола │
└─────┴───────────┴──────────┴─────────┴─────────┴─────────┴────────────┘
┌─────┬───────────┬────────────────────────────────────────┬────────────┐
3. Основные материалы, оборудование, питательные среды
Автоклав (паровой стерилизатор) ГОСТ 19569
Вытяжной шкаф
Ламинарный шкаф для культуры клеток
(класс I)
Ламинарный шкаф (класс II)
Инвертированный микроскоп
Весы лабораторные 2-го класса точности ГОСТ 24104
с наибольшим пределом взвешивания 200 г
РН-метр любой марки с набором
электродов с погрешностью измерений
+-0,1
Термометры, 0-100°С, цена деления 1°С ГОСТ 28498
Дистиллятор электрический ДЭ-4
Термостаты электрические суховоздушные
с автоматическим терморегулятором до
50°С, поддерживающие заданную
температуру с погрешностью +- 1°С
Центрифуга лабораторная ТУ 42-2145
рефрижераторная, например, типа ЦЛР-1МР
Ультрацентрифуга
Встряхиватель
Холодильники бытовые электрические с
температурой в камере 4-6°С
Холодильники бытовые электрические
низкотемпературные с температурой в
камере - 20°С
Морозильник с температурой в камере
-70°С
Магнитная мешалка
Аппарат фильтрационный, например, марки
АФ-142 "Н" или марки АФ-142 "К"
Макропористое стекло, например, марки