6.2. Установление градуировочных характеристик метода
В хроматограф при условиях, выбранных согласно п. 6.4, вводят по 1 мкл индивидуальных рабочих стандартных растворов гербицидов и определяют их времена удерживания. Затем записывают хроматограмму 1 мкл стандартного раствора смеси гербицидов. Разбавляют раствор в 2; 4; 8 раз и также записывают хроматограммы полученных растворов. Проводят математическую обработку всех полученных хроматограмм и, построив график зависимости площади пика от количества вещества для каждого компонента, убеждаются в его линейности для данного диапазона концентраций.
6.3. Подготовка хроматографической колонки
Стеклянную колонку длиной 1,5-2,0 м и диаметром 3 мм промывают ацетоном, сушат и заполняют готовой насадкой. Для этого один конец колонки плотно закрывают небольшим тампоном из стекловаты, промытой ацетоном, затем кусочком марли и подсоединяют к водоструйному насосу. После этого через свободный конец заполняют колонку насадкой, засыпая ее небольшими порциями и уплотняя постукиванием по колонке палочкой с резиновым наконечником при постоянно работающем насосе. Необходимо следить за тем, чтобы носитель ложился равномерно, без пустот, с одинаковой плотностью. Заполненную колонку закрывают тампоном из стекловаты и помещают в термостат колонок хроматографа, не подсоединяя к детектору. Кондиционируют колонку в токе газа-носителя при расходе его 15-20 мл/мин при температуре 100°С в течение 7-8 ч и при температуре 200°С в течение 5-6 ч.
6.4. Подготовка газового хроматографа к работе
Подготовку хроматографа проводят в соответствии с инструкцией по эксплуатации.
Устанавливают с помощью пенного расходомера расход азота (гелия), например 35-36 мл/мин. Подсоединяют колонку к детектору и проверяют герметичность соединений, нанося на них кисточкой мыльную пену.
Устанавливают поступление в детектор водорода со скоростью 12-14 мл/мин и воздуха 240-260 мл/мин.
Устанавливают температуру термостата колонок 190-200°С, испарителя 200-220°С, термостата детектора 220-240°С. Поджигают водород в детекторе, устанавливают рабочий диапазон измерений на шкале электрометра и скорость диаграммной ленты (0,6 см/мин). При работе в рабочем диапазоне измерений электрометра высота пика пропазина, соответствующая 1 мкл стандартного раствора с концентрацией 1 мкг/мл, должна составить около 1/3 шкалы самописца.
Критерием полноты кондиционирования хроматографической колонки является отсутствие дрейфа и нерегулярных шумов нулевой линии.
Для насыщения колонки исследуемыми соединениями вкалывают подряд 10-12 раз по 1 мкл стандартного раствора пропазина с концентрацией 10 мкг/мл, после чего колонка полностью готова к работе.
Определение параметров колонки и детектора проводят согласно приложению 1.
6.5. Определение характеристик линейности детектирования
Для определения характеристик линейности диапазона детектирования готовят растворы стандартной смеси гербицидов шести концентраций, различающихся не более чем в два раза. По 1 мкл полученных растворов вводят в испаритель хроматографа и записывают хроматограммы на рабочей шкале электрометра. Рассчитывают площади пиков на полученных хроматограммах и определяют отношение концентрации гербицидов к площади пиков: (K = С / S).
Линейность детектирования сохраняется для концентраций, при которых значения K отличаются не более чем на 5%:
. В случае отсутствия по какой-либо причине линейности детектирования следует построить градуировочный график для всех используемых диапазонов чувствительности.
7. Выполнение измерений
В испаритель хроматографа вводят микрошприцем 1 мкл стандартного раствора смеси гербицидов и записывают хроматограмму. Времена удерживания всех компонентов рассчитывают по трем результатам хроматографирования. Этот параметр необходимо проверять ежедневно перед началом определений после выхода прибора на режим.
Затем вводят в испаритель 1 мкл экстракта пробы, подготовленного, как указано в пп. 4.3 и 4.4. Симм-триазиновые гербициды идентифицируют, сравнивая времена удерживания индивидуальных соединений на хроматограмме пробы морской воды с соответствующими пиками на хроматограмме смеси стандартных веществ.
Условия хроматографирования смеси симм-триазиновых гербицидов приведены в табл. 42.
Таблица 42
Условия* хроматографирования симм-триазиновых гербицидов на колонках с НЖФ различной полярности
Параметр | Колонка | |
размеры 1,5 м х 3,0 мм; карбовакс 20 М (5%) на хроматоне зернения 0,16-0,20 мм (I) | размеры 2,0 м х 3,0 мм; SE-30 (5%) на хроматоне зернения 0,16-0,20 мм (II) | |
| 1. Рабочая шкала электрометра, А |  |  |
 |  | |
 |  | |
| 2. Скорость протяжки ленты, мм/мин | 6 | 6 |
3. Расход газов,  | ||
| азота (гелия) | 32-38 | 32-38 |
| водорода | 12-14 | 12-14 |
| воздуха | 240-260 | 240-260 |
| 4. Температурный режим, °С | ||
| колонки | 190-200 | 180-190 |
| испарителя | 205-215 | 200-210 |
| детектора | 220-230 | 215-225 |
______________________________
* Условия приведены для газового хроматографа "Хром-5" (Чехо-Словакия).
Типичные хроматограммы смеси симм-триазиновых гербицидов представлены на рис. 24 и 25. Времена удерживания относительно пропазина приведены в табл. 43.
Таблица 43
Относительные времена удерживания* симм-триазиновых гербицидов (по пропазину) при хроматографировании на НЖФ различной полярности
Наименование гербицида | НЖФ | |
карбовакс 20 М (5%) (колонка I**) | SE-30 (5%) (колонка II**) | |
| Тербуметон | 0,83 | 1,16 |
| Пропазин | 1,00 | 1,00 |
| Атразин | 1,41 | 1,00 |
| Прометрин | 1,52 | 1,86 |
| Котофор | 1,55 | - |
| Симазин | 1,92 | 0,97 |
| Семерон | 2,25 | 1,56 |
| Мезоранил | 4,08 | 1,33 |
| Метазин | 6,22 | 2,91 |
______________________________
* Время удерживания получено при анализе симм-триазиновых гербицидов на хроматографе "Хром-5" (Чехо-Словакия).
** Параметры колонок приведены в табл. 42.
Времена удерживания некоторых гербицидов на основной колонке I практически совпадают, поэтому в случае их одновременного присутствия в пробе морской воды эти гербициды будут выходить на хроматограмме одним пиком. В случае необходимости их можно разделить на колонке с неполярной жидкой фазой, например SE-30 (5%) (используемой также для анализа хлорорганических пестицидов). Для этого необходимо предварительно определить времена удерживания гербицидов на альтернативной колонке аналогично тому, как это делалось на основной.
8. Обработка результатов
8.1. Математическая обработка результатов измерений
Содержание симм-триазиновых гербицидов в анализируемой пробе морской воды находят по формуле:
, где 
- концентрация вещества в пробе, мкг/л; 
- концентрация соответствующего гербицида в стандартном растворе, мкг/мл; 
- площадь пика определяемого вещества на хроматограмме пробы морской воды, равная произведению высоты пика на его ширину при h / 2, 
; 
- площадь пика соответствующего гербицида на хроматограмме стандартного раствора, 
; 
- объем экстракта после концентрирования, мл; 
- объем пробы морской воды, взятой для анализа, л.
- концентрация вещества в пробе, мкг/л; - концентрация соответствующего гербицида в стандартном растворе, мкг/мл; - площадь пика определяемого вещества на хроматограмме пробы морской воды, равная произведению высоты пика на его ширину при h / 2, ; - площадь пика соответствующего гербицида на хроматограмме стандартного раствора, ; - объем экстракта после концентрирования, мл; - объем пробы морской воды, взятой для анализа, л.8.2. Числовые значения показателей погрешности МВИ
На основании метрологической аттестации, проведенной ВНИИАСМ-НПО "Исари" Госстандарта СССР с 01.09 по 25.12.89 г. (табл. 44), настоящая методика определения симм-триазиновых гербицидов в морской воде допущена к применению в организациях Росгидромета.
Таблица 44
Результаты метрологической аттестации МВИ
Наименование гербицида | Диапазон концентрации, мкг/л | Показатель воспроизводимости  , % | Показатель правильности  , % | Показатель погрешности МВИ, суммарная погрешность  , % |
| Тербуметон | 0,8-5,0 | 8,3 | 25,0 | 26,0 |
5,0-10,0 | 3,9 | 9,7 | 10,8 | |
10,0-20,0 | 2,6 | 7,2 | 7,8 | |
| Пропазин | 1,2-5,0 | 7,4 | 17,0 | 19,0 |
5,0-10,0 | 6,7 | 14,0 | 16,0 | |
10,0-20,0 | 5,2 | 10,6 | 12,2 | |
| Атразин | 0,8-4,0 | 9,5 | 18,0 | 20,0 |
4,0-10,0 | 5,2 | 12,3 | 14,0 | |
10,0-20,0 | 3,2 | 6,8 | 7,6 | |
| Симазин | 1,0-5,0 | 12,0 | 31,0 | 34,0 |
5,0-10,0 | 2,4 | 6,0 | 7,0 | |
10,0-20,0 | 2,4 | 6,0 | 7,0 | |
| Семерон | 1,2-5,0 | 8,4 | 24,0 | 26,0 |
5,0-10,0 | 5,5 | 11,5 | 13,2 | |
10,0-20,0 | 4,6 | 10,3 | 11,5 | |
| Мезоранил | 0,8-4,0 | 8,8 | 31,0 | 33,5 |
4,0-12,0 | 6,0 | 13,0 | 15,0 | |
12,0-40,0 | 4,9 | 11,0 | 12,3 | |
| Метазин | 0,8-4,0 | 9,6 | 29,5 | 32,0 |
4,0-12,0 | 8,7 | 18,0 | 20,7 | |
12,0-20,0 | 4,9 | 10,2 | 11,6 | |
20,0-40,0 | 3,6 | 7,8 | 8,8 |
9. Требования к квалификации аналитика
Анализ проб воды на содержание симм-триазиновых гербицидов должен выполнять опытный, квалифицированный химик-аналитик, владеющий техникой очистки растворителей, проведения экстракции, вакуумной перегонки, знающий основы газовой хроматографии и прошедший соответствующий инструктаж по технике безопасности.
10. Нормы затрат рабочего времени на анализ
Для анализа 10 проб гербицидов требуется 39,0 чел.-ч, в том числе: