- использовать стерильные одноразовые или разрешенные к применению для этих целей в установленном порядке контейнеры (емкости) для сбора, хранения и доставки проб;
- транспортировать пробы в переносках или укладках с раздельными гнездами;
- соблюдать асептические условия для предотвращения инфицирования пациента в процессе выполнения инвазивных мероприятий;
- собирать пробы в стерильную одноразовую пластиковую или стеклянную посуду (не контаминированную биоматериалом, не имеющую трещин, отколотых краев и других дефектов).
Пробы биологического материала необходимо собирать следующим образом:
- до начала антибактериальной терапии, при отсутствии такой возможности - непосредственно перед повторным введением (приемом) препаратов;
- в количестве (вес, объем), необходимом для выполнения анализа, т.к. недостаточное количество биоматериала приводит к получению ложных результатов;
- с минимальным загрязнением материала нормальной микрофлорой, т.к. ее избыток приводит к ошибочной трактовке полученных результатов.
При сборе проб следят за тем, чтобы в лаборатории при вскрытии емкости с биоматериалом не образовывался аэрозоль: пробы крови и других жидкостей организма аккуратно без образования пены переносят из шприца в сухую и/или наполненную средой (антикоагулянтом) посуду. При отборе проб крови предпочтительно следует использовать вакуумсодержащие системы.
Сопроводительным документом в лабораторию является направление на микробиологическое исследование по форме N 204-у (утверждена приказом МЗ СССР от 04.10.1080 г. N 1030), где указываются: учреждение здравоохранения, дата и время взятия материала (часы), фамилия, имя, отчество и возраст пациента; отделение, в котором он находится; номер медицинской карты стационарного больного или амбулаторной карты, номер участка (для АПУ), адрес места жительства, место работы или учебы; диагноз, дата заболевания, показания к обследованию (в направлении подчеркивается); материал, посылаемый на исследование (в направлении подчеркивается), цель и наименование исследования; антибактериальные (иммунные) препараты, если проба сдается на фоне антибиотико- и/или иммунотерапии; фамилию, имя, отчество лечащего врача (консультанта), направляющего материал на исследование. При направлении биоматериалов, полученных при вскрытии, указывают также отделение, в котором умер больной.
Отбор пробы просветных фекалий. Фекалии тотчас после дефекации собирают из предварительно продезинфицированных, тщательно промытых (особое внимание следует уделять удалению дезинфектантов, оказывающих ингибирующее действие на микрофлору фекалий и существенно искажающих результаты исследования), ополоснутых заварным кипятком и охлажденных до комнатной температуры судна или горшка сразу после дефекации в стерильный одноразовый контейнер при помощи вмонтированного в его крышку стерильного шпателя-ложечки. В экстремальных ситуациях (реанимационные больные, маленькие дети) материал собирают в такой же контейнер с ложечкой или ректальным тампоном; возможен также сбор материала со стерильной сухой пеленки, не касаясь ткани.
Пробы можно также собирать с помощью специальных стерильных палочек или проволочной петли, приготовленных из нержавеющего металла (алюминий, сталь, титан).
При наличии в испражнениях патологических примесей слизи, крови, хлопьев, гноя они отбираются отдельно от пробы фекалий.
Наиболее подходящей емкостью для сбора фекалий является специальный стерильный одноразовый контейнер с широким горлом и завинчивающейся крышкой, содержащий одноразовую ложечку-шпатель, вмонтированную в крышку контейнера. Если фекалии жидкие, контейнер заполняют не более чем на 1/3 объема для предохранения от разбрызгивания материала при вскрытии емкости в лаборатории. Если фекалии оформленные, плотные - помещают в контейнер 3-4 ложечки (1,5-2,0 г). Материал, собранный с несвежего постельного белья, искажает результат, а заполненный до верха контейнер не подлежит исследованию.
В случае отсутствия в лаборатории одноразовой посуды порцию фекалий помещают в специально смонтированную стерильную стеклянную посуду, разрешенную к использованию в установленном порядке.
Отбор проб пристеночных фекалий. В случае невозможности получения испражнений после дефекации, материал берут непосредственно из прямой кишки с помощью "зонд тампона", вводя его в кишку на 8-10 см, осторожно вращая тампон вокруг оси, собирают материал с крипт ануса и так же осторожно извлекают тампон.
Тампон помещают в стерильную пробирку однократного применения или в транспортировочную емкость с агаризованной средой без угля или в стерильную стеклянную пробирку, или в стерильную пробирку с забуференным физиологическим раствором с глицерином либо с пептонной водой.
При профилактических обследованиях здоровых лиц на сальмонеллоносительство накануне взятия испражнений для исследования допустимо применение солевого слабительного (25-30 г. магнезии сульфата - 
), растворенного в теплой воде.
), растворенного в теплой воде. Не принимается для исследования на сальмонеллоносительство материал, взятый на дому в отсутствии медицинского работника.
Кровь для исследования берут в начале заболевания, а также повторно в период лихорадки или в разгар рецидивов стерильным шприцем из локтевой вены в объеме 2-10 мл (в зависимости от возраста пациента), в более поздние сроки или при слабовыраженной клинической картине - 15-20 мл. Взятую кровь высевают у постели больного непосредственно во флаконы с питательной средой для культивирования сальмонелл.
У детей до одного года кровь берут в доступных количествах из пальца, пятки или мочки уха.
Рвотные массы и промывные воды желудка отбирают при заболевании, сопровождающемся соответствующей симптоматикой, в объеме до 100 мл. Для исследования используют первые порции промывных вод, полученные без применения бактерицидных средств.
В случае кислой реакции (рН<4,5) рвотных масс их перед посевом нейтрализуют 10%-ным раствором бикарбоната натрия, промывные воды центрифугируют 15 минут при 3000 об/мин и исследуют осадок. В случае невозможности центрифугирования допускается высев нативного материала.
Желчь (дуоденальное содержимое) собирают в стерильные пробирки. При этом отдельно собирают дуоденальное содержимое, пузырную желчь и желчь из желчных протоков (порции А, В и С соответственно).
Кислая реакция, белесоватый оттенок, наличие хлопьев свидетельствуют о примеси желудочного сока и делают материал непригодным для бактериологического исследования.
Спинномозговая жидкость подлежит исследованию при наличии менингеального или менингоэнцефалитического синдромов.
Пробу (3-5 мл) помещают в стерильную пробирку и доставляют в лабораторию, предохраняя материал от замораживания (можно использовать термос).
Мочу для исследования собирают после тщательного туалета наружных половых органов. Первую порцию мочи отбраковывают (не берут для анализа), остальную (в количестве 20-30 мл) собирают в стерильную посуду и доставляют в лабораторию. Мочу центрифугируют 15 минут при 3000 об/мин и для исследования используют осадок. Допускается высев нативного материала.
Операционный и секционный материал для исследования отбирают в случае необходимости при оперативных вмешательствах или на месте вскрытия. Масса пробы должна составлять не менее 20 г.
Микробиологические лаборатории (отделения) учреждений здравоохранения, не имеющие инфекционных отделений, производят бактериологическую диагностику сальмонеллеза с идентификацией выделенных культур до рода Sallmonell.
Далее для определения видовой и групповой принадлежности (серотипирование) направляются в микробиологическую лабораторию ФГУЗ "Центр гигиены и эпидемиологии в городе Москве" или микробиологические лаборатории отделов ФГУЗ "Центр гигиены и эпидемиологии в административном округе" при обязательном выполнении следующих требований:
- выделенные культуры сальмонелл направляются в микробиологическую лабораторию в двух вариантах: на "простом косячке" и "голодном агаре";
- для передачи культуры сальмонелл оформляются следующие документы:
журнал передачи культур (с обязательными графами - Ф.И.О. и подпись работника лаборатории, принявшего культуру, и дата передачи);
бланк "Направление выделенных культур сальмонелл из внутрибольничных очагов и в случае "заносов" с указанием наименования больницы, отделения и номера палаты; Ф.И.О. пациента, от которого выделены культуры, возраст, диагноз, адрес местожительства; название культуры (желательно с идентификацией вида);
паспорт штамма: номер культуры, название культуры, культуральные, биохимические свойства штамма. Данные серологических исследований.
Обязательно указывается Ф.И.О., направившего культуру. Дата (число, месяц, год), подпись ответственного лица.
Этиологическая расшифровка случаев сальмонеллеза проводится не позднее 4-5-го дня с момента взятия пробы.
Микробиологические (бактериологические) лаборатории (отделения) учреждений здравоохранения, имеющие инфекционные отделения, а также микробиологические (бактериологические) лаборатории (отделения) инфекционных больниц производят бактериологическую диагностику сальмонеллеза с идентификацией выделенных культур до вида посредством серотипирования.
Для установления этиологии сальмонеллеза с тяжелым и (или) атипичным клиническим течением, при расследовании эпидемических вспышек сальмонеллеза, в том числе внутрибольничных, или в случаях "заносов" сальмонеллеза в больницы, а также в целях мониторирования внутрибольничной инфекции, выявления источников инфекции, путей и факторов передачи, культуры сальмонелл направляются для типирования с помощью молекулярно-биологических методик (пульсэлектрофореза, ПЦР-типирования, мультилокусного секвенирования и прочее) в микробиологическую лабораторию Референс-центра по мониторингу за сальмонеллезами (ФГУН Центральный НИИ эпидемиологии Роспотребнадзора (Новогиреевская, д. 3-а, тел. 672-11-32).
Примечание:
Референс-центр по мониторингу за возбудителями инфекционных и паразитарных болезней (вирусные гепатиты, внутрибольничные инфекции, сальмонеллезы, ОКИ, ВИЧ и ВИЧ-ассоциированные инфекции, инфекции верхних и нижних дыхательных путей, ИПП) с функциями и в рамках ММСП (2005) (бактериальный менингит) создана в соответствии с приказом Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека от 17 марта 2008 г., N 88 "О мерах по совершенствованию мониторинга за возбудителями инфекционных и паразитарных болезней" (приложение 3) создан на базе ФГУН Центральный НИИ эпидемиологии Роспотребнадзора (адрес: Москва, ул. Новогиреевская, д. 3-а, тел. 672-11-32).
Микробиологическая лаборатория ФГУЗ "Центр гигиены и эпидемиологии в городе Москве" расположена по адресу: Москва, Графский переулок, дом 4\9, тел. 687-40-64
| Начальник Управления организации медицинской помощи | А.В. Погонин |
| Начальник Управления организации медицинской помощи детям и матерям | В.А. Прошин |