Многие методы для коррекции неспецифичности требуют постановки холостого опыта.
Для оценки аналитической специфичности следует использовать примеси, которые, исходя из химической структуры, являются репрезентативными представителями тех групп веществ, которые с физиологической точки зрения имеют практическое значение.
Интерференция обусловлена влиянием веществ на ход реакции. Способ влияния (повышение, понижение) и степень влияния могут быть различными.
Важным аспектом этой проблемы является интерференция лекарств. Лекарственные вещества, в зависимости от вида, дозы, способа применения, могут воздействовать на результаты лабораторных исследований различными путями: различают фармакологическую интерференцию в организме и техническую интерференцию в ходе выполнения анализа.
Низкая специфичность, интерференция снижают правильность метода. Поэтому предпочтение следует отдавать более специфичным методам и неподвергающимся интерференции.
IV. Аналитическая чувствительность. Предел чувствительности
Аналитическая чувствительность метода определяется его способностью выявлять наименьшие различия между двумя концентрациями исследуемого вещества. В процессе калибровки устанавливается диапазон калибровочной кривой, что является частью аналитической характеристики метода. При прочих равных условиях меньший наклон калибровочной кривой соответствует более высокой чувствительности метода, что позволяет выявить меньшие количества анализируемого вещества. На нижнем и верхнем пределах калибровочной кривой способность к выявлению веществ ухудшается.
Нижний предел чувствительности метода - это концентрация исследуемого вещества, которая соответствует наименьшему результату определения, статистически достоверно отличающемуся от показателей холостой пробы. Предел чувствительности может быть охарактеризован количественно. Он аналитически характеризует метод и позволяет сравнивать методы по этому качеству.
Кроме того, нижний предел чувствительности позволяет избежать ошибок, связанных с измерением величин, более низких, чем нижний предел чувствительности.
Практически определить нижний предел чувствительности для фотометрических методов можно следующим образом: проводят многократное исследование (n = 20) холостой пробы и проб с низкой концентрацией анализируемого вещества и устанавливают с заданным уровнем значимости статистически достоверные различия между холостой и опытной пробой с низким значением анализируемого вещества, которое и будет количественно соответствовать нижнему пределу чувствительности метода.
Экспериментально установлено, что обычно нижний предел чувствительности в фотометрических методах равен среднему значению холостой пробы плюс 3 среднеквадратических отклонения.
Теоретические основы определения допустимых погрешностей результатов лабораторных исследований
Определение допустимых пределов погрешностей метода преследует цель - установить приемлемость аналитических качеств метода для клинических целей.
Теоретические основы определения допустимой аналитической вариации базируются на следующем:
1. Определение аналитической вариации метода (среднеквадратического отклонения и коэффициента вариации) путем оценки аналитической надежности метода.
2. Теоретический расчет аналитической вариации, как фиксированной части биологической вариации. Смысл такого подхода состоит в определении степени влияния аналитической вариации на биологическую, тем самым - определении степени влияния аналитической вариации на расширение диапазона нормальных или референтных величин.
Соотношение между различными видами вариации определяется следующим уравнением:
S
где: S
S
S
Биологическая вариация имеет два источника - внутрииндивидуальная и межиндивидуальная вариации:
S
Математически рассчитано, что, если отношение Sан к Sбиологической меньше 0,4, то увеличение биологической вариации за счет аналитической будет незначительным.
Существуют и другие способы определения соотношения аналитической и биологической вариаций. По данным ряда авторов коэффициент вариации метода не должен превышать 1/8 области нормальных пределов в процентах от средней величины нормы. При этом нормальные величины рассматриваются как совокупность аналитической и биологической вариации.
Во всех случаях, при расчете допустимых пределов погрешности метода индивидуально для каждого вещества и метода аналитическая вариация, полученная экспериментально, сопоставляется с теоретически рассчитанными величинами.
3. Медицински допустимые пределы погрешностей. Этот способ оценки допустимых пределов погрешностей может быть основан на опросе мнений врачей-клиницистов и лабораторных работников.
Каждое исследуемое вещество определяется в конечном счете для клинических целей - установления диагноза, контроля за лечением, обследования здоровых. Поэтому медицински допустимые пределы погрешностей в различных клинических ситуациях будут различными, но они безусловно дополняют представление о допустимых погрешностях в зависимости от цели лабораторного исследования.
Однако, медицински допустимые пределы погрешности, в зависимости от поставленной цели, могут включать различные виды вариаций. Например, при повторном анализе теста медицински допустимые пределы погрешностей будут включать внутрииндивидуальную и аналитическую вариации изо дня в день.
При диспансерном обследовании здоровых наибольшее значение для разделения нормы и патологии будут иметь межиндивидуальные колебания.
Определение медицински допустимых пределов погрешностей позволит в ряде случаев не добиваться большей точности, чем она требуется в определенных клинических обстоятельствах, что связано в ряде случаев с увеличением расходов на проведение анализов.
В таблице 12 приводятся допустимые пределы аналитической вариации (V%) для ряда веществ, принятые рабочей группой экспертов по лабораторной диагностике стран-членов СЭВ.
Таблица 12
Допустимые пределы аналитической вариации (разброса) для анализируемых компонентов
┌────┬────────────────────────────────────────────────────┬─────────────┐
│ NN │ Анализируемый компонент │ V% │
├────┼────────────────────────────────────────────────────┼─────────────┤
│ 1 │ 2 │ 3 │
├────┼────────────────────────────────────────────────────┼─────────────┤
│ │ Клиническая биохимия │ │
│ │ │ │
│ 1 │Адреналин │ 7 │
│ 2 │Аланинаминотрансфераза │ 7 │
│ 3 │Альбумин │ 3 │
│ 4 │а-Амилаза │ 10 │
│ 5 │Аммиак │ 5 │
│ 6 │Аспартатаминотрансфераза │ 7 │
│ 7 │Белок общий │ 3 │
│ 8 │Белковые фракции │ 8 │
│ 9 │Билирубин │ 10 │
│ 10 │Глюкоза │ 5 │
│ 11 │Глюкозо-6-фосфатдегидрогеназа │ 8 │
│ 12 │y-Глутамилтранспептидаза │ 10 │
│ 13 │Железо │ 5 │
│ 14 │Иммуноглобулины │ 7 │
│ 15 │Калий │ 2 │
│ 16 │Кальций │ 2 │
│ 17 │Кортизол │ 7 │
│ 18 │Креатинин │ 5 │
│ 19 │Креатинкиназа │ 7 │
│ 20 │Лактатдегидрогеназа │ 7 │
│ 21 │Лейцинаминопептидаза │ 10 │
│ 22 │Липиды общие │ 5 │
│ 23 │Магний │ 2 │
│ 24 │Медь │ 5 │
│ 25 │Мочевая кислота │ 7 │
│ 26 │Мочевина │ 7 │
│ 27 │Натрий │ 2 │
│ 28 │Норадреналин │ 7 │
│ 29 │Триглицериды │ 7 │
│ 30 │Фосфор │ 5 │
│ 31 │Фосфатаза щелочная │ 7 │
│ 32 │Хлор │ 3 │
│ 33 │Холинэстераза │ 7 │
│ 34 │Холестерин │ 7 │
│ │ │ │
│ │ Гематология │ │
│ │ │ │
│ 1 │Гемоглобин │ 2 │
│ 2 │Гематокрит │ 3 │
│ 3 │Лейкоциты │ 10 │
│ 4 │Эритроциты │ 10 │
└────┴────────────────────────────────────────────────────┴─────────────┘
┌────┬────────────────────────────────────────────────────┬─────────────┐
В целом, клиническая характеристика аналитических качеств метода и определение допустимых пределов погрешностей метода направлены на повышение диагностической значимости и экономической эффективности лабораторных тестов.
| Начальник Главного управления лечебно-профилактической помощи | А.М. Москвичев |
Приложение 5
к приказу Минздрава СССР
от 23 апреля 1985 г. N 545
Перечень лабораторных исследований, результаты которых подлежат контролю качества с помощью отечественных контрольных материалов
Утратило силу
Приложение 6
к приказу Минздрава СССР
от 23 апреля 1985 г. N 545
Задание на разработку и производство контрольных материалов для клинико-диагностических лабораторий
┌────┬──────────────────────────────────────────────┬───────────────────┐
│ NN │ Наименование и назначение │Потребность по │
│п/п │ контрольного материала │годам (в литрах) │
│ │ ├─────────┬─────────┤
│ │ │1986-1990│1991-1995│
├────┼──────────────────────────────────────────────┼─────────┼─────────┤
│ 1 │ 2 │ 3 │ 4 │
├────┼──────────────────────────────────────────────┼─────────┼─────────┤
│ │ I. Контрольные материалы для │ │ │
│ │ биохимических исследований │ │ │
│ │ │ │ │
│ 1 │Сероконт-В - контрольная лошадиная сыворотка │ 1500 │ 2000 │
│ │для контроля воспроизводимости результатов ис-│ │ │
│ │следований ручными и автоматическими методами.│ │ │
│ │Расширение числа контролируемых компонентов │ │ │
│ │(натрий, калий, кальций, фосфор неорганический│ │ │
│ │и др.). │ │ │
│ 2 │Сероконт-П-эквин - контрольная лошадиная сыво-│ 150 │ 200 │
│ │ротка с исследованным содержанием компонентов│ │ │
│ │в нормальной концентрации для контроля прави- │ │ │
│ │льности результатов исследований ручным и ав- │ │ │
│ │томатическими методами. Расширение числа конт-│ │ │
│ │ролируемых компонентов (натрий, калий, фосфор │ │ │
│ │неорганический и др.). │ │ │
│ 3 │Патосероконт-П-эквин - контрольная лошадиная │ 100 │ 150 │
│ │сыворотка с исследованным содержанием компоне-│ │ │
│ │нтов в патологической концентрации для контро-│ │ │
│ │ля правильности результатов ручными и автома- │ │ │
│ │тическими методами. │ │ │
│ 4 │Сероконт-П - контрольная человеческая сыворот-│ 100 │ 200 │
│ │ка для контроля правильности результатов исс- │ │ │
│ │ледования липидных компонентов. Расширение │ │ │
│ │числа контролируемых компонентов, включая бел-│ │ │
│ │ковые фракции методом электрофореза. │ │ │
│ 5 │Контрольная человеческая сыворотка с исследо- │ │ 400 │
│ │ванным содержанием компонентов в нормальной │ │ │
│ │концентрации для контроля правильности │ │ │
│ │результатов исследования активности фермен-│ │ │
│ │тов. │ │ │
│ │ │ │ │
│ │ II. Контрольные материалы для исследований │ │ │
│ │ мочи │ │ │
│ │ │ │ │
│ 1 │Контрольные материалы с исследованным содержа-│ │ 300 │
│ │нием компонентов в нормальной концентрации для│ │ │
│ │контроля правильности результатов исследований│ │ │
│ │химического состава мочи. │ │ │
│ 2 │Контрольные материалы с исследованным содержа-│ │ 200 │
│ │нием компонентов в патологической концентрации│ │ │
│ │для контроля правильности результатов исследо-│ │ │
│ │ваний химического состава мочи. │ │ │
│ │ │ │ │
│ │ III. Контрольные материалы для │ │ │
│ │ коагулологических исследований │ │ │
│ │ │ │ │
│ 1 │Стандартный препарат тромбопластина с установ-│ │ 200 │
│ │ленным временем. │ │ │
│ 2 │Контрольная человеческая плазма с известным │ │ 100 │
│ │содержанием тромбопластина. │ │ │
│ 3 │Контрольная человеческая плазма с установлен- │ │ 100 │
│ │ным временем частично активированного тромбо- │ │ │
│ │пластина. │ │ │
└────┴──────────────────────────────────────────────┴─────────┴─────────┘
┌────┬──────────────────────────────────────────────┬───────────────────┐
| Начальник Главного лечебно-профилактической помощи МЗ СССР | А.М. Москвичев |