1. Исследование параллельных проб.
2. Исследование случайных проб.
3. Исследование повторных проб.
4. Исследование смешанной пробы.
5. Метод средней нормальных величин (по данным больных).
6. Межлабораторный контроль качества.
Методы, основанные на использовании специальных контрольных материалов. Методы, использующие специальные контрольные материалы, дают возможность проводить контроль правильности и воспроизводимости результатов гематологических исследований. Основным требованием к контрольным материалам является их стабильность во времени. Приготовление контрольных материалов для гематологических исследований связано с трудностями, обусловленными кратким сроком жизнедеятельности клеток крови вне организма и быстрым нарушением их функциональных и физико-химических свойств в течение времени. По этой объективной причине срок годности контрольного материала ограничен.
В настоящее время рекомендуются следующие контрольные материалы:
1. Стандартный раствор гемиглобинцианида (производство ВНР).
2. Донорская кровь.
3. Раствор гемолизированной крови.
4. Консервированная кровь.
5. Фиксированные клетки крови (суспензия).
6. Клетки синтетических и других материалов, имитирующие клетки крови.
7. Контрольные мазки (окрашенные и неокрашенные, нормальные и патологические).
Контроль воспроизводимости
Контроль воспроизводимости (или сходимости) результатов гематологических исследований осуществляют с помощью контрольных материалов и расчета статистических параметров для оценки качества _ работы: средней арифметической величины (Х), среднеквадратического отклонения (S) и коэффициента вариации (V). Для этого в течение 20 рабочих дней в контрольном материале исследуют выбранный компонент методом, применяемым в данной лаборатории. Если какой-либо из результатов резко отличается от остальных, то его оценивают с помощью критерия Т.
После установления статистических критериев строится карта контроля качества, представляющая собой систему координат, на оси абсцисс которой откладывают дни исследований, а на оси ординат - концентрацию компонента в соответствующих единицах. Через середину оси ординат параллельно абсциссе проводят прямую (обозначает среднюю арифметическую) и вверх и вниз от средней и параллельно ей проводят в соответствии с выбранным _ _ масштабом прямые, которые обозначают контрольные пределы Х + 2S и Х - 2S.
Контрольная карта строится на каждый компонент и на одну серию контрольного материала. При перемене серии контрольного материала нужно провести 20-дневные исследования и построить новую контрольную карту.
Каждый результат, полученный в дальнейшем при исследовании контрольного материала той же серии в последующие дни, отмечается на карте в виде точки и служит для оценки воспроизводимости результатов данного компонента.
Пример 1. Построение контрольной карты для гемоглобина. В течение 20 дней определения содержания гемоглобина в контрольном растворе получены следующие результаты:
120 122 121 123 120
121 122 123 121 121
123 119 120 118 119
120 199 122 118 119
n = 20
_
Х = 120,5; S = 1,6; V = 1,33%
_
Х + S = 120,5 + 1,6 = 122,1
_
Х + 2S = 120,5 + 3,2 = 123,7
_
Х - S = 120,5 - 1,6 = 118,9
Х - 2S = 120,5 - 3,2 = 117,3
При использовании контрольных карт целесообразно пользоваться предупредительными и контрольными критериями, ориентируясь на которые можно обнаружить недостатки в работе лаборатории.
Контроль правильности
Контроль правильности результатов гематологических исследований осуществляют с помощью контрольных материалов с исследованным содержанием компонентов, расчета статистических параметров и определения достоверности различий между полученным и паспортным значением.
При этом следует сделать 10 параллельных исследований компонента в контрольном материале, рассчитать из полученных результатов среднюю арифметическую величину и сравнить с паспортными данными этого компонента. Если полученный результат укладывается в пределы допустимых отклонений, имеющихся в паспорте контрольного материала, то правильность исследований - удовлетворительная. В противном случае следует оценить достоверность различий результатов с помощью статистических критериев (например, по тесту Стьюдента).
Методы, не требующие контрольных материалов
Исследование параллельных проб позволяет оценить воспроизводимость результатов исследований с помощью образцов крови больных. Для этого отбирают 10 случайных проб и каждую пробу исследуют дважды. Результаты таких дублированных анализов используются для характеристики качества исследований.
Пример 2. Для оценки воспроизводимости результатов подсчета лейкоцитов исследовали параллельно 10 образцов цельной крови с антикоагулянтом. Результаты представлены в табл. 5.
Таблица 5
Определение воспроизводимости с помощью дублированного подсчета количества лейкоцитов (10 проб)
┌──────────┬───────────┬─────────────┬─────────────────┬────────────────┐
│ N │ А │ В │ А - В │ (А - В) │
│ образца │ │ │ │ │
├──────────┼───────────┼─────────────┼─────────────────┼────────────────┤
│ 1 │ 2 │ 3 │ 4 │ 5 │
├──────────┼───────────┼─────────────┼─────────────────┼────────────────┤
│ 1 │ 7.970 │ 7.400 │ 570 │ 324.900 │
│ 2 │ 9.470 │ 9.230 │ 240 │ 57.600 │
│ 3 │ 7.410 │ 7.230 │ 180 │ 32.400 │
│ 4 │ 14.820 │ 15.410 │ 590 │ 345.100 │
│ 5 │ 3.610 │ 4.690 │ 1.080 │ 1.166.400 │
│ 6 │ 4.590 │ 6.280 │ 1.690 │ 2.856.100 │
│ 7 │ 4.490 │ 3.700 │ 790 │ 624.100 │
│ 8 │ 9.980 │ 10.870 │ 890 │ 792.100 │
│ 9 │ 14.890 │ 14.260 │ 630 │ 396.900 │
│ 10 │ 5.240 │ 5.540 │ 300 │ 90.000 │
│ │ │ ────┴─────────────────┴────────────────┤
│ │ │ Сумма (А - В) │
└──────────┴───────────┴────────────────────────────────────────────────┘
┌──────────┬───────────┬─────────────┬─────────────────┬────────────────┐
S = 578,3
Сначала находят разницу между значениями каждой пары, опуская знаки; затем разницу возводят в квадрат, все складывают и делят на 2n (где n - число пар), так как каждая пара представляет собой индивидуальную переменную и каждый член пары имеет свою собственную вариабельность.
Затем рассчитывают среднеквадратическое отклонение различий и строят контрольную карту для оценки воспроизводимости, аналогичную описанной выше для контрольных проб. Разницу между двумя анализами, сделанными для одной и той же пробы, отмечают каждый день на карте. Контрольные пределы карты - 0 +- 2S (в примере для подсчета лейкоцитов - от -1,157 до +1,157). Результаты, попадающие вне контрольных пределов, с 95% вероятностью покажут существование каких-то нарушений в аналитической системе. В этом случае выявляют возможную причину большого разброса результатов и исследование повторяют более тщательно.
Исследование случайной пробы. Метод этот аналогичен предыдущему методу параллельных проб. Разница заключается в том, что вместо анализа всех проб лаборант выборочно исследует повторно пробы (одну или две пробы). Эти пробы могут также случайно выбираться заведующим лабораторией без ведома лаборанта. Таким путем зав. лабораторией оценивает воспроизводимость результатов, получаемых лаборантами.