6.4.3. В приведенных условиях выполнения измерений (см. п. 7.2.3) собственно фенол и 2-нитрофенол выходят одним пиком, и если при анализе проб морской воды на хроматографе с ДЭЗ, снабженном колонкой с SE-30, установлено присутствие 2-нитрофенола в анализируемой пробе воды, то пик 1 на хроматограмме (рис. 16) соответствует сумме собственно фенола и 2-нитрофенола. В таких случаях содержание фенола в пробе устанавливают по разности с учетом вычисленной концентрации 2-нитрофенола. Для этого дополнительно строят градуировочный график для фенола (ГГф) по хроматограммам градуировочной смеси алкилфенолов без 2-нитрофенола и градуировочный график для 2-нитрофенола (ГГнф) по хроматограммам градуировочной смеси без фенола.
6.5. Подготовка хроматографических колонок для определения хлор- и нитрофенолов
Стеклянные колонки длиной 1,8-2,0 м промывают смесью ацетона и диэтилового эфира, сушат и заполняют готовым носителем с нанесенной жидкой фазой следующим образом: один конец колонки закрывают тампоном из стеклянной ваты и подсоединяют к водоструйному насосу, а в другой конец через воронку засыпают приготовленный носитель небольшими порциями, постукивая колонку палочкой с резиновым концом, и следят за тем, чтобы носитель ложился равномерно. Заполненную колонку закрывают тампоном из стеклянной ваты, устанавливают в термостат хроматографа с ДЭЗ, не подсоединяя к детектору, и кондиционируют в токе азота (скорость 15-20 мл/мин) при температуре 100-120°C в течение 4-6 ч и при температуре 180-200°C в течение 7-8 ч.
6.6. Подготовка хроматографической колонки для определения алкилфенолов
Необходимый для заполнения стеклянной колонки длиной 1,8-2,0 м объем твердого носителя инертона-супер (около 10 г) взвешивают на технических весах и помещают в фарфоровую чашку. Навеску АФС (5% массы носителя - около 0,72 г) растворяют в диэтиловом эфире и добавляют к твердому носителю. Диэтиловый эфир испаряют на водяной бане при постоянном осторожном перемешивании до приобретения фазой воздушно-сухого состояния. Чашку с приготовленной насадкой помещают в сушильный шкаф и выдерживают при 100°C в течение 1 ч. Далее заполняют стеклянную колонку длиной 1,8 м приготовленной насадкой и кондиционируют ее (см. п. 6.5).
6.7. Подготовка хроматографа для определения хлор- и нитрофенолов
6.7.1. Подготовку хроматографа с ДЭЗ проводят в соответствии с инструкцией по эксплуатации. С помощью пенного расходомера устанавливают расход азота через колонку 23-26 мл/мин и на поддув детектора ДЭЗ 110-120 мл/мин. Оптимальный расход азота через колонку и на поддув детектора ДЭЗ определяется качеством получаемых хроматограмм. Подсоединяют колонку к детектору и проверяют герметичность соединений при помощи мыльной пены. Измеряют суммарный расход азота на выходе прибора. Эту величину контролируют ежедневно перед началом работ. Устанавливают температуру термостата колонок 140-150°C, температуру термостата детектора 220-230°C, испарителя 210-220°C, рабочий предел измерений на шкале электрометра 
А, скорость диаграммной ленты 240 мм/ч.
А, скорость диаграммной ленты 240 мм/ч. 6.7.2. Критерием полноты кондиционирования газохроматографической колонки является соответствие дрейфа и нерегулярных шумов нулевой линии паспортным данным прибора. После выхода прибора на режим для насыщения колонки вводят несколько раз по 1 мкл стандартного раствора смеси ацетилпроизводных хлор- и нитрофенолов (получение см. п. 6.3.2).
Определение параметров колонки и детектора проводят согласно приложению 1.
6.8. Подготовка хроматографа для определения алкилфенолов
6.8.1. Подготовку хроматографа с ПИД также проводят в соответствии с инструкцией по эксплуатации. Устанавливают расход азота через колонку 20-25 мл/мин, водорода - 25-30 мл/мин, воздуха - 280-300 мл/мин. Подсоединяют откондиционированную колонку к детектору и проверяют герметичность соединений при помощи мыльной пены. Устанавливают температуру термостата колонок 90 °C, термостата детектора - 230-240°C, испарителя - 220-230°C, рабочий предел измерений на шкале электрометра 
А, скорость диаграммной ленты 180 мм/ч. Режим программирования температуры термостата колонок следующий: изотерма при 90°C 3 мин; линейное программирование 
со скоростью 10°/мин (Критерий полноты кондиционирования колонки см. п. 6.7.)
А, скорость диаграммной ленты 180 мм/ч. Режим программирования температуры термостата колонок следующий: изотерма при 90°C 3 мин; линейное программирование со скоростью 10°/мин (Критерий полноты кондиционирования колонки см. п. 6.7.) 6.8.2. Для насыщения колонки анализируемыми соединениями вводят 5-7 раз по 1 мкл стандартного раствора смеси алкилфенолов, после этого колонка готова к анализу. Определение параметров колонки и детектора проводят согласно приложению 1.
6.9. Определение характеристик линейности
6.9.1. Для определения характеристик линейности диапазона детектирования дозируют стандартные смеси хлор- и нитрофенолов и стандартные смеси алкилфенолов шести концентраций, отличающихся не более чем в 2 раза, и проводят через все стадии анализа (см. пп. 4.3-4.5). Вводят в испаритель хроматографа по 1 мкл полученных растворов и записывают хроматограммы на рабочей шкале электрометра. Рассчитывают площади пиков на полученных хроматограммах и определяют отношение (K) концентрации фенолов С к площадям пиков S:
K = С / S.
Линейность детектирования сохраняется для концентраций, при которых значения K отличаются не более чем на 5%:
, где индексы 1 и 2 относятся соответственно к предыдущей и последующей концентрациям стандартной смеси фенолов.
6.9.2. В случае отсутствия по какой-либо причине линейности детектирования следует построить градуировочный график для всех используемых рабочих шкал электрометра.
7. Выполнение измерений
7.1. Выполнение измерений содержания хлор- и нитрофенолов
7.1.1. В испаритель хроматографа с ДЭЗ, снабженного колонкой с OV-225, вводят микрошприцем 1 мкл стандартного раствора 1 (получение см. п. 6.3.2) и записывают хроматограмму. Времена удерживания всех компонентов рассчитывают по трем результатам хроматографирования. Этот параметр необходимо проверять перед началом определений после выхода прибора на режим.
7.1.2. Затем вводят в испаритель 1 мкл экстракта пробы (см. пп. 4.3, 4.4). Хлорфенолы и нитрофенол идентифицируют, сравнивая времена удерживания индивидуальных соединений на хроматограмме пробы морской воды с соответствующими пиками на хроматограмме стандартного раствора 1.
7.1.3. В случае идентификации на хроматограмме пробы воды, полученной на колонке с OV-225, пика с относительным временем удерживания 0,45-0,47, принадлежащем ацетилпроизводным 2,4,6-трихлор- и 2-нитрофенола, необходимо ввести в испаритель хроматографа с ДЭЗ, снабженного колонкой с SE-30,1 мкл стандартного раствора 2 (см. п. 6.3.2), определить времена удерживания ацетилпроизводных 2,4,6-трихлорфенола и 2-нитрофенола, а затем ввести в испаритель 1 мкл экстракта этой пробы воды.
7.1.4. Условия хроматографирования ацетилпроизводных хлор- и нитрофенолов приведены в табл. 23.
Таблица 23
Условия* хроматографирования ацетилпроизводных хлор- и нитрофенолов на НЖФ разной полярности
Параметр | НЖФ | |
OV-225 | SE-30 | |
| 1. Рабочие шкалы электрометра, А |  |  |
 |  | |
 |  | |
| 2. Скорость протяжки ленты, мм/ч | 240 | 240 |
3. Расход газов,  | ||
| азота в колонку | 23-26 | 23-26 |
| азота в детектор | 110-120 | 110-120 |
| 4. Температурный режим, °C | ||
| колонки | 140-150 | 130-140 |
| испарителя | 210-220 | 210-220 |
| детектора | 220-230 | 220-230 |
______________________________
* Условия приведены для газового хроматографа "Цвет-100", модель 110.
7.1.5. Типические хроматограммы ацетилпроизводных хлор- и нитрофенолов представлены на рис. 17 и 18. Относительные времена удерживания по отношению к ацетилпроизводному пентахлорфенола даны в табл. 24.
Таблица 24
Относительные времена удерживания* ацетилпроизводных хлор- и нитрофенолов (по ацетилпроизводному пентахлорфенола) при хроматографировании на колонках с НЖФ разной полярности**
Хлор- и нитрофенолы | НЖФ | |
OV-225 | SE-30 | |
| 3-Хлорфенол | 0,15-0,17 | 0,09-0,11 |
| 2,4-Дихлорфенол | 0,19-0,21 | 0,19-0,21 |
| 2,4,6-Трихлорфенол | 0,45-0,47 | 0,40-0,42 |
| 2,3,4,5,6-Пентахлорфенол | 1,00 | 1,00 |
| 2-Нитрофенол | 0,45-0,47 | 0,12-0,13 |
| 4-Нитрофенол | 0,69-0,71 | 0,19-0,21 |
______________________________
* Времена удерживания получены при анализе смеси хлор- и нитрофенолов на хроматографе "Цвет-100", модель 110.
** Параметры колонок приведены в табл. 23.
7.2. Выполнение измерений содержания алкилфенолов
7.2.1. В испаритель хроматографа с ПИД вводят микрошприцем 1-5 мкл стандартного раствора алкилфенолов, включают кнопку программирования и записывают хроматограмму. Времена удерживания всех компонентов смеси рассчитывают по трем результатам хроматографирования. Этот параметр проверяют ежедневно перед началом определений после выхода прибора на режим.
7.2.2. Затем вводят в испаритель 1-5 мкл экстракта пробы (подготовку см. п. 4.5). Алкилфенолы идентифицируют, сравнивая времена удерживания компонентов пробы морской воды на полученной хроматограмме с соответствующими параметрами на хроматограмме смеси стандартных алкилфенолов.
7.2.3. Условия хроматографирования смеси алкилфенолов приведены в табл. 25.
Таблица 25
Условия* хроматографирования смеси алкилфенолов
Параметр | Значение |
| Рабочая шкала электрометра, А |  |
 | |
 | |
 | |
| Скорость протяжки ленты, мм/ч | 180 |
Расход газов,  | |
| азота | 20-25 |
| водорода | 25-30 |
| воздуха | 280-300 |
| Температурный режим, °C колонки | Изотерма при 90°C (3 мин) линейное программирование 90-200°C со скоростью 10°/мин |
| испарителя | 220-230 |
| детектора | 230-240 |
______________________________
* Условия приведены для газового хроматографа "Хром-5" (Чехо-Словакия#).
7.2.4. Типичная хроматограмма смеси алкилфенолов приведена на рис. 16. Относительные времена удерживания по отношению к 3,4-диметилфенолу даны в табл. 26.