6.2. Способ приготовления стандартного раствора ПХБ
Для приготовления стандартного раствора ПХБ растворяют приблизительно 10 мг соединения хлофен А-50 в 100 мл гексана.
Полученный раствор тщательно перемешивают, отбирают 0,5 мл, переносят в мерную колбу на 100 мл, доводят объем гексаном до метки. Концентрация ПХБ в полученном растворе составляет приблизительно 500 нг/мл (рассчитывается с точностью до единиц нг/мл).
6.3. Способ приготовления смешанного стандартного раствора ХОП и ПХБ
Для приготовления стандартного раствора смеси ХОП и ПХБ смешивают равные объемы стандартных растворов ХОП и ПХБ.
Концентрации отдельных компонентов ХОП и ПХБ в полученном растворе следующие: линдана - 25 нг/мл; 
- 25 нг/мл; ДДЭ - 125 нг/мл; ДДД - 200 нг/мл; ДДТ - 250 нг/мл; ПХБ - 250 нг/мл.
- 25 нг/мл; ДДЭ - 125 нг/мл; ДДД - 200 нг/мл; ДДТ - 250 нг/мл; ПХБ - 250 нг/мл.6.4. Установление градуировочных характеристик метода определения ХОП
В хроматограф при выбранных условиях (см. п. 7.4) вводят по 3 мкл стандартного раствора ХОП 3-5 раз. По результатам индивидуальных дозирований определяют среднюю высоту каждого пика и времена удерживания отдельных ХОП (рис. 19). Разбавляют раствор гексаном в 2, 4, 8 раз и записывают хроматограммы полученных растворов. Проводят математическую обработку полученных хроматограмм. Градуировочный график строят в координатах "высота пика - масса компонента". Убеждаются в его линейности для данного диапазона концентраций.
6.5. Установление градуировочных характеристик метода определения ПХБ
В испаритель хроматографа при выбранных условиях (см. п. 7.4) вводят несколько раз по 3 мкл стандартного раствора ПХБ - хлофена А-50. На полученной хроматограмме (рис. 20) определяют времена удерживания и среднюю высоту каждого из 14 самых высоких пиков отдельных компонентов хлофена А-50.
Разбавляют стандартный раствор ПХБ в 2, 4, 8 раз и записывают хроматограммы полученных растворов. Проводят математическую обработку всех полученных хроматограмм. Градуировочный график строят в координатах "сумма высот самых интенсивных пиков ПХБ на хроматограммах стандартных растворов - масса хлофена А-50".
6.6. Установление градуировочных характеристик метода определения ХОП и ПХБ при их совместном присутствии
В испаритель хроматографа при выбранных условиях (см. п. 7.4) вводят несколько раз по 3 мкл стандартной смеси ХОП и ПХБ (приготовление см. п. 6.3). На полученной хроматограмме 1 (рис. 21) по результатам единичных вкалываний определяют среднюю высоту каждого пика. Затем берут 1 мл этой же смеси и проводят реакцию дегидрохлорирования (см. п. 4.5). Из верхнего гексанового слоя отбирают 3 мкл и вводят в хроматограф несколько раз при тех же условиях. Записывают хроматограмму 2 (рис. 22).
В результате дегидрохлорирования на хроматограмме 2 два пика (ДДТ и ДДД) исчезают, пик ДДЭ возрастает за счет ДДТ, появляется новый пик ДМЭ** (производное ДДД). Пики ПХБ при этом остаются прежней высоты.
Разбавляют смешанный стандартный раствор ХОП и ПХБ гексаном в 2, 4, 8 раз. Эти растворы также проводят через реакцию дегидрохлорирования и записывают их хроматограммы.
Градуировочный график в координатах "высота пика - концентрация ХОП (нг/мл)" для 
, 
и ДДЭ строят, измеряя высоту пика на хроматограмме 1, полученной до дегидрохлорирования. Высота пика ДДТ подсчитывается как разность высот пиков, имеющих соответствующее время удерживания на хроматограммах 1 и 2 (т.е. до и после дегидрохлорирования). Аналогично рассчитывается высота пика ДДТ.
, и ДДЭ строят, измеряя высоту пика на хроматограмме 1, полученной до дегидрохлорирования. Высота пика ДДТ подсчитывается как разность высот пиков, имеющих соответствующее время удерживания на хроматограммах 1 и 2 (т.е. до и после дегидрохлорирования). Аналогично рассчитывается высота пика ДДТ. Для построения градуировочного графика ПХБ сравнивают высоты отдельных пиков ПХБ на хроматограммах 2 (после дегидрохлорирования) и стандартных растворов ПХБ. График строится в координатах "сумма высот отдельных пиков ПХБ - содержание ПХБ (нг/мл)".
6.7. Подготовка хроматографической колонки
Стеклянную колонку длиной 2 м (промытую последовательно бензолом и ацетоном) заполняют хроматоном N-AW-DMCS с НЖФ SE-30 (5%) или DC-200 (3%) следующим образом: закрывают один конец колонки стеклянной ватой, устанавливают марлевую прокладку и подсоединяют к водоструйному насосу, в другой конец колонки через воронку засыпают насадку; во время всей операции колонку аккуратно простукивают. После заполнения колонки закрывают свободный ее конец тампоном из стеклянной ваты. Колонку устанавливают в термостат колонок хроматографа, не подсоединяя к детектору электронного захвата, и кондиционируют в токе азота (30 мл/мин) при температуре 220°C в течение 5-6 ч.
6.8. Подготовка газового хроматографа к работе
6.8.1. Подготовку хроматографа проводят в соответствии с инструкцией по эксплуатации. С помощью пенного расходомера устанавливают расход азота через колонку 25-30 мл/мин., через детектор 120-130 мл/мин. Оптимальный расход азота через колонку и на поддув детектора ДЭЗ определяется качеством получаемых хроматограмм. Подсоединяют колонку к детектору и проверяют герметичность соединений при помощи мыльной пены. Измеряют суммарный расход азота на выходе прибора. Эту величину контролируют ежедневно перед началом работ. Устанавливают температуру термостата колонок 205-210°C, детектора 215-220°C, испарителя - 225°C, рабочий диапазон шкалы электрометра 
А, скорость диаграммной ленты 240 мм/ч.
А, скорость диаграммной ленты 240 мм/ч. 6.8.2. Критерием полноты кондиционирования газохроматографической колонки является соответствие дрейфа и нерегулярных шумов нулевой линии паспортным данным прибора. После выхода прибора на режим для насыщения колонки вводят несколько раз по 3 мкл стандартного раствора смеси ХОП.
Определение параметров колонки и детектора проводят согласно приложению 1.
6.9. Определение характеристик линейности
6.9.1. Для определения характеристик линейности диапазона детектирования готовят растворы стандартных смесей ХОП и ПХБ шести концентраций, различающихся не более чем в два раза. В испаритель хроматографа вводят по 3 мкл полученных растворов и записывают хроматограммы на рабочей шкале электрометра. Измеряют высоты пиков на полученных хроматограммах и определяют отношения концентраций С некоторых компонентов смеси ХОП и ПХБ к высотам пиков h:
K = С / h.
Линейность детектирования сохраняется для концентраций, при которых значения K отличаются не более чем на 5%:
. 6.9.2. В случае отсутствия по какой-либо причине линейности детектирования следует построить градуировочный график для всех используемых диапазонов.
7. Выполнение определений
7.1. В испаритель хроматографа вводят микрошприцем 3 мкл стандартного раствора ХОП и записывают хроматограмму. Времена удерживания всех компонентов рассчитывают по трем результатам хроматографирования. Этот параметр необходимо проверять перед началом определений после выхода прибора на режим.
Те же операции выполняют со стандартным раствором ПХБ и стандартной смесью ХОП и ПХБ.
7.2. Затем вводят в испаритель хроматографа 3 мкл экстракта пробы (подготовку см. п. 4.3 и 4.4). Отдельные компоненты ХОП идентифицируют, сравнивая времена удерживания индивидуальных соединений на хроматограмме пробы морской воды с соответствующими пиками на хроматограмме смеси стандартных веществ ХОП.
7.3. В том случае, если на хроматограмме экстракта пробы морской воды детектируются пики как ХОП, так и ПХБ, обрабатывают экстракт согласно п. 4.5***, отбирают 3 мкл и вводят в хроматограф. На полученной хроматограмме пики идентифицируют согласно п. 6.6.
Дегидрохлорирование следует проводить также и в том случае, если идентификация ХОП по одной хроматограмме не может быть проведена однозначно. Превращение 
, 
является достаточно надежным критерием идентификации.
, является достаточно надежным критерием идентификации. 7.4. Условия хроматографирования ХОП и ПХБ на отечественном приборе "Цвет-100" мод. 110 приведены в табл. 28.
Таблица 28
Условия хроматографирования ХОП и ПХБ на SE-30
Параметр | Значение |
| Рабочая шкала электрометра, А |  |
 | |
 | |
| Скорость протяжки ленты, мм/ч | 240 |
Расход азота,  | |
| в колонке | 25-30 |
| в детекторе | 120-130 |
| Температурный режим, °C | |
| колонки | 205-210 |
| испарителя | 225 |
| детектора | 215-220 |
7.5. Типичные хроматограммы смеси ХОП и ПХБ представлены на рис. 21, 22. Относительные времена удерживания ХОП по отношению к ДДЭ приведены в табл. 29 (хроматограф "Цвет-100", мод. 110).
Таблица 29
Времена удерживания ХОП (относительно ДДЭ) на SE-30*
ХОП | Относительное время удерживания |
 | 0,18-0,20 |
 | 0,25-0,27 |
| n,n'-ДДЭ | 1,00 |
| n,n'-ДДД | 1,34-1,36 |
| n,n'-ДДТ | 1,53-1,55 |
______________________________
* Параметры колонки см. табл. 28.
7.6. Времена удерживания ДДТ и ДДД на рекомендуемой колонке совпадают с временами удерживания отдельных пиков ПХБ, поэтому в случае их одновременного присутствия в пробах морской воды необходимо провести дегидрохлорирование (см. п. 4.5). В результате дегидрохлорирования пики ДДТ и ДДД исчезают, пик ДДД возрастает за счет ДДТ, появляется новый пик ДМЭ (за счет ДДД). Пики ПХБ при этом остаются прежней высоты.