4. Порядок кодирования проб и процедура определения очередности испытаний проб
4.1. Исполнители получают кодированные (зашифрованные) пробы. Кодирование проб - присвоение каждой пробе отдельного неповторяющегося номера. Другой информации для идентификации пробы исполнитель не получает.
4.2. Принцип кодирования указывают в программе валидации (например, пробы кодируют четырехзначными номерами, в которых первые две цифры (01, 02, 03 и т.д.) обозначают номер микросерии и номер аналитической серии, а последние цифры - номер пробы).
4.3. Код пробы указывается на контейнерах или емкостях, в которых проба хранится и транспортируется.
4.4. Очередность использования проб во всех аналитических сериях устанавливает руководитель этапа валидации. Для определения очередности испытаний проб может быть использован, например, метод случайных чисел. Способ определения очередности указывают в программе валидации.
4.5. Руководитель этапа валидации составляет таблицу кодов всех проб, которая прилагается к отчету.
5. Определение повторяемости
 | |
| 542 × 66 пикс. Открыть в новом окне | |
Многократное определение проводят при максимально одинаковых условиях, а именно в условиях повторяемости (получают независимые результаты), т.е. проводят несколько серий определений один за другим в одной лаборатории, с применением одного метода, на идентичных частях одной и той же пробы, одним и тем же оператором, на одном и том же комплекте (экземпляре) испытательного оборудования и средств измерения.
Для оценки повторяемости проводят определение показателя в образцах, выбранных и приготовленных в соответствии с п. п. 1.7 и 2.2 настоящего Приложения. Число образцов в каждом диапазоне должно быть одинаковым. Для получения достаточно надежных оценок повторяемости метода необходимо, чтобы эти оценки были получены как минимум при 30 степенях свободы для каждого диапазона концентраций. Если статистический план, на основании которого проводилось исследование, не обеспечивает 30 степеней свободы, то оценку параметров эмпирического распределения нельзя считать представительной.
Рассчитывают стандартное отклонение повторяемости и доверительный интервал разности двух результатов, полученных в условиях повторяемости.
Конкретный алгоритм расчета зависит от метода анализа и плана эксперимента, предусмотренного в программе валидации.
Пример плана эксперимента для оценки повторяемости метода определения белкового азота, позволяющий максимально упростить расчеты, приведен в Прилож. 8.
6. Определение внутрилабораторной воспроизводимости (в одной лаборатории или в одной организации)
Для определения внутрилабораторной воспроизводимости проводят определение показателя в образцах, выбранных и приготовленных в соответствии с п. п. 1.7 и 2.2 настоящего Приложения, в одной организации одним и тем же методом, на идентичных частях одной и той же пробы, в одной или нескольких лабораториях, меняя следующие факторы:
- разные операторы;
- различные комплекты (экземпляры) испытательного оборудования и средств измерения, предусмотренные в НД на метод.
 | |
| 547 × 44 пикс. Открыть в новом окне | |
Конкретный алгоритм расчета зависит от метода анализа и плана эксперимента, предусмотренного в программе валидации.
Для получения достаточно надежных оценок внутрилабораторной воспроизводимости метода необходимо, чтобы эти оценки были получены как минимум при 30 степенях свободы для каждого диапазона концентраций. Если статистический план, на основании которого проводилось исследование, не обеспечивает 30 степеней свободы, то оценку параметров эмпирического распределения нельзя считать представительной.
7. Определение правильности
Для нового метода с целью определения правильности применяют два основных подхода:
1. Предлагаемый метод сравнивается со вторым методом, точность которого установлена. Метод сравнения может быть методом, приведенным в ГФ или в общей фармакопейной статье ФС 42-3874-99.
2. Используется метод добавок. Анализируемое вещество и образцы плацебо с внесенным в них веществом, охватывающие заданный диапазон концентраций, исследуются в соответствии с методом. По результатам анализа строят график, для построения которого отмечается на оси ОХ - ожидаемое количество анализируемого соединения; на оси ОУ - измеренное количество анализируемого соединения.
При отсутствии систематической ошибки измеренные значения должны лежать на прямой линии, проходящей через начало координат и имеющей наклон 1.
Рассчитывают стандартное отклонение и доверительный интервал точки пересечения графика с осью ОУ и угол наклона графика. Для построения графика используют, как правило, метод наименьших квадратов, для расчета коэффициентов - регрессионный анализ. Конкретный алгоритм расчета зависит от метода анализа и плана эксперимента по валидации, предусмотренного в программе валидации.
Правильность считают удовлетворительной при соблюдении следующих условий:
1. Значения, полученные по обеим методикам анализа, не должны различаться на значительную величину (не должны превышать доверительный интервал среднего значения).
2. а) Среднее выявление должно, как правило, находиться в диапазоне от 98 до 102% от добавленной величины.
б) Доверительный интервал (Р = 95%) точки пересечения графика с осью ОУ должен включать начало координат и не превышать +/- 10% от измеряемой величины. Доверительный интервал (Р = 95%) наклона линии регрессии должен включать 1 и быть в пределах 0,9 - 1,1.
Для определения правильности проводят определение показателя в образцах, содержащих анализируемое вещество в необходимом диапазоне (низкая, средняя, высокая концентрация). Анализ проводят не менее 5 - 6 раз.
Приложение 5 Форма составления протокола валидации (первичные данные)
Приложение 5
ФОРМА СОСТАВЛЕНИЯ ПРОТОКОЛА ВАЛИДАЦИИ (ПЕРВИЧНЫЕ ДАННЫЕ)
Наименование организации
ПРОТОКОЛ ВАЛИДАЦИИ
1 этап валидации
1. Лаборатория N _________________________________________________
2. Наименование лабораторией _____________________________________
3. Зав. лаборатории ______________________________________________
4. Исполнитель ___________________________________________________
5. Наименование метода и N СОП ___________________________________
6. Условия проведения испытаний:
6.1. Оборудование (тип, марка, заводской номер, важные для метода
характеристики, для КИП - дата последней поверки или калибровки).
6.2. Реактивы для построения калибровочного графика (дата
приготовления основного и рабочего стандартных растворов).
6.3. Реактивы (N НД, квалификация или фирма и N по каталогу, N
серии, дата выпуска, срок годности).
При использовании растворов (буферных, солевых и т.д.) указать