Аппаратура, материалы и реактивы по 4.1.1.1.
Лупа складная карманная по ГОСТ 25706.
Микроскоп световой биологический по ГОСТ 8074, обеспечивающий увеличение 
.
. 4.4.2.2 Подготовка к испытанию
Подготовка тест-штаммов и питательных сред - по 4.1.1.2.
4.4.2.3 Проведение испытания
4.4.2.3.1 Реактивированную культуру тест-штамма высевают на испытуемую и контрольную среду (МПБ или МПА), инкубируют посевы и делают от трех до пяти пересевов по 4.4.1.3.
В каждом пассаже на испытуемой и контрольной среде визуально оценивают формы роста микроорганизмов в жидких питательных средах; визуально, с помощью лупы или под малым увеличением микроскопа - формы колоний на плотных средах.
4.4.2.3.2 В жидких питательных средах различают следующие формы роста микроорганизмов:
- с равномерным помутнением среды при неизменной окраске или с изменением цвета,
- придонный рост с образованием осадка разной консистенции (рыхлый, гомогенный, хлопьевидный, в виде косички, волокнистый, пастообразный или др.) на дне пробирки,
- пристеночный - при прозрачной жидкой части культуры наличие рыхлых хлопьев или компактных зерен, прикрепленных к поверхности стенок пробирки,
- поверхностный рост с образованием пленки (белой или окрашенной, тонкой, толстой, влажной, сухой кожистой или др.) на поверхности среды.
4.4.2.3.3 На плотных питательных средах колонии различают по:
- величине (диаметру);
- форме (круглая, амебовидная или другая);
- контуру края (ровный, волнистый, бахромчатый, расплывчатый и т.д.);
- цвету;
- рельефу (плоский, выпуклый);
- консистенции (слизистая, кожистая, сухая и т.д.);
- характеру поверхности (блестящая и гладкая - S-форма, шероховатая и матовая - R-форма).
4.4.2.4 Оценка результатов
Формы роста тест-штаммов в жидкой питательной среде и формы образуемых ими колоний - на плотной должны соответствовать характеристике в таблице 3, что свидетельствует об отсутствии влияния питательной среды на типичность микроорганизмов. Если наблюдают несоответствие установленным характеристикам, которое сохраняется вплоть до последнего пассажа, среду бракуют.
При несоответствии форм роста тест-штамма в жидкой контрольной среде и форм колоний - на плотной опыт дважды повторяют с новыми пробами контрольных питательных сред. При несоответствии типичных свойств тест-штамма в повторных опытах меняют исходную культуру тест-штамма как диссоциированную или контаминированную другим микроорганизмом.
4.4.3 Метод определения влияния питательной среды на сахаролитическую способность тест-штаммов (способность сбраживать сахара)
Сущность метода заключается в посеве реактивированной микробной культуры тест-штамма на испытуемую питательную среду, инкубировании посевов, трех-, пятикратных пересевах на свежие порции той же питательной среды, пересевах из культур, выросших в каждом пассаже, в среды Гисса и визуальной оценке сбраживания сахаров по изменению цвета и образованию газа в соответствии с таблицей 3.
4.4.3.1 Аппаратура, материалы и реактивы
Аппаратура, материалы и реактивы по 4.4.1.1.
Пробирки с поплавками-трубочками, запаянными с одного конца, стерильные.
Арабиноза.
Галактоза.
Глюкоза кристаллическая гидратная по ГОСТ 975.
Ксилоза.
Лактоза.
Мальтоза.
Маннит.
Раффиноза.
Сахароза.
Сорбит.
Натрия гидроокись по ГОСТ 4328, раствор концентрации 1 
.
. 4.4.3.2 Подготовка к испытанию.
Подготовка тест-штаммов
Тест-штаммы реактивируют по 4.1.1.2.
Приготовление индикатора Андредэ
Растворяют 0,5 г кислого фуксина в 16 
раствора гидроокиси натрия концентрации 1 
, прибавляют 100 
дистиллированной воды, выдерживают 24 ч при 37°С, кипятят в течение 5 мин и фильтруют. Хранят во флаконах темного стекла. Готовый индикатор должен быть соломенно-желтого цвета.
раствора гидроокиси натрия концентрации 1 , прибавляют 100 дистиллированной воды, выдерживают 24 ч при 37°С, кипятят в течение 5 мин и фильтруют. Хранят во флаконах темного стекла. Готовый индикатор должен быть соломенно-желтого цвета. Приготовление сред Гисса
К 100 
дистиллированной воды добавляют 1 г пептона, 0,5 г хлористого натрия и нагревают до растворения ингредиентов. Раствор фильтруют через бумажный фильтр, устанавливают рН 7,0-7,4, прибавляют 0,5-1,0 г одного из сахаров (глюкозы, галактозы, лактозы, мальтозы, сахарозы, ксилозы, маннита или другого) и 1 
индикатора Андредэ. Готовую среду разливают в пробирки, стерилизованные вместе с поплавками, которые кладут запаянным концом вверх. Пробирки со средами трижды стерилизуют текучим паром при 112°С по 20-30 мин.
дистиллированной воды добавляют 1 г пептона, 0,5 г хлористого натрия и нагревают до растворения ингредиентов. Раствор фильтруют через бумажный фильтр, устанавливают рН 7,0-7,4, прибавляют 0,5-1,0 г одного из сахаров (глюкозы, галактозы, лактозы, мальтозы, сахарозы, ксилозы, маннита или другого) и 1 индикатора Андредэ. Готовую среду разливают в пробирки, стерилизованные вместе с поплавками, которые кладут запаянным концом вверх. Пробирки со средами трижды стерилизуют текучим паром при 112°С по 20-30 мин. 4.4.3.3 Проведение испытания
В пробирки или чашки Петри с испытуемой и контрольной (МПБ или МПА) питательными средами вносят по 0,2 
20-24-часовых культур тест-штаммов и инкубируют от 20 до 24 ч при температуре 
.
20-24-часовых культур тест-штаммов и инкубируют от 20 до 24 ч при температуре . В среды Гисса с различными сахарами, приготовленные по 4.4.3.2 с соблюдением условий стерильности, вносят по 0,2-0,5 
20-24-часовой культуры тест-штамма микроорганизма в испытуемой и контрольной питательной среде. Пробы выдерживают при 
и оценивают изменения питательных сред через 24 и 48 ч. Розовая окраска сред свидетельствует о процессе кислотного брожения сахара; появление пузырьков в поплавках - об образовании газа.
20-24-часовой культуры тест-штамма микроорганизма в испытуемой и контрольной питательной среде. Пробы выдерживают при и оценивают изменения питательных сред через 24 и 48 ч. Розовая окраска сред свидетельствует о процессе кислотного брожения сахара; появление пузырьков в поплавках - об образовании газа.