Руководящий документ РД 52.24.439-2007 "Массовая концентрация неионогенных синтетических поверхностно-активных веществ и полиэтиленгликолей в водах. Методика выполнения измерений экстракционно-фотометрическим методом" (утв. Федеральной службой по гидромет стр. 5

10.4.2 При выполнении условия (1) учитывают знак разности между измеренными и приписанными значениями содержания неионогенных СПАВ в образцах. Эта разность должна иметь как положительное, так и отрицательное значение, если же все значения имеют один знак, это говорит о наличии систематического отклонения. В таком случае требуется установить новую градуировочную зависимость.

11 Выполнение измерений

11.1 Выделение неионогенных СПАВ из воды

В делительную воронку вместимостью 1 помещают 0,70 воды, добавляют 30 г хлорида натрия, 30 экстракционной смеси и экстрагируют неионогенные СПАВ в течение 10 мин вручную или с помощью аппарата для встряхивания. После расслаивания экстракт вместе с эмульсией сливают в коническую колбу с притёртой пробкой. К водной пробе добавляют 5 хлороформа и экстрагируют ещё 2 мин. Экстракт после расслаивания сливают в ту же колбу.

Если проба была законсервирована на месте отбора экстракционной смесью, то её переносят из склянки в делительную воронку вместе с растворителем, добавляют 30 г хлорида натрия и проводят экстракцию, не добавляя больше экстракционную смесь.

Склянку, в которой хранилась проба, споласкивают 5 хлороформа и используют его для проведения второй экстракции.

Для разрушения эмульсии полученный экстракт фильтруют под небольшим вакуумом через воронку с пористой пластиной, на которую дополнительно кладут фильтр "белая лента", вырезанный точно по размеру пластины. Если воронка имеет шлиф и отвод, то фильтрование проводят в делительную воронку вместимостью 100 . Если используется воронка без отвода, то фильтрат собирают в колбу Бунзена или пробирку с отводом вместимостью 100 , а затем переносят его в делительную воронку.

Осадок на фильтре промывают дважды по 5 этилового спирта, нагретого почти до кипения. Первой порцией спирта промывают также колбу или флакон, в которых находился экстракт. К экстракту добавляют 50 дистиллированной воды и промывают его, встряхивая воронку в течение 1,5-2 мин. После расслоения фаз хлороформный экстракт переносят через воронку с комочком хлопковой или стеклянной ваты, смоченной хлороформом, в мерную колбу или градуированную пробирку вместимостью 25 с притертой пробкой. Промывают вату небольшим количеством хлороформа и доводят объём экстракта до метки. Если экстракт получился мутным, добавляют безводного сульфата натрия до осветления экстракта.

Если экстракт, полученный при экстракции исходной пробы воды, прозрачен, не содержит эмульсии или взвешенных частиц, то его можно сразу фильтровать через вату в мерную колбу или пробирку.

11.2 Анализ экстракта

С помощью сухой пипетки с одной отметкой вместимостью 5 отбирают 5,0 полученного экстракта, переносят в сухую центрифужную коническую пробирку, добавляют 1,0 раствора с массовой концентрацией неионогенных СПАВ 10 , 2  спиртового раствора ФМК и тщательно перемешивают содержимое пробирки фторопластовой (или стеклянной) палочкой. Оставляют пробирки стоять в течение 10 мин, затем центрифугируют их в течение 5 мин при скорости 1500 об/мин. После остановки центрифуги хлороформ из пробирок осторожно сливают, плавно переворачивая пробирку, или отбирают его с помощью шприца с длинной иглой так, чтобы не взмутить осадок. В пробирке при этом должно остаться около 0,2 растворителя.

Затем стенки пробирки из пипетки промывают 1,5 смеси 3 частей хлороформа с 1 частью этилового спирта и вновь центрифугируют 5 мин. Промывной раствор также осторожно удаляют. В пробирки добавляют по 0,5 раствора гидроксида натрия 2  , и ставят на водяную баню с температурой 80-100°С (низкий стакан вместимостью 250 с небольшим количеством дистиллированной воды).

Через 5 мин пробирки вынимают, содержимое пробирок разбавляют до 5-7 дистиллированной водой и переносят в мерные колбы (или градуированные пробирки) вместимостью 25 , ополаскивая центрифужные пробирки еще дважды дистиллированной водой. Добавляют к полученному раствору 3,0 раствора уксусной кислоты, 1,0 раствора ПКФ, доводят дистиллированной водой до метки и перемешивают. Добавляют 1,0 раствора ДДП или ЦП и вновь перемешивают, переворачивая колбу вверх-вниз (не встряхивать!).

Через 10 мин измеряют оптическую плотность полученных проб в кюветах с толщиной поглощающего слоя 3 см относительно дистиллированной воды на спектрофотометре или фотометре с непрерывной разверткой спектра при длине волны 690 нм, на фотометре, снабженном светофильтрами - со светофильтром, максимум пропускания которого находится при длине волны от 670 до 700 нм.

Одновременно с пробами выполняют холостой опыт. Для этого в две центрифужные пробирки помещают 5 хлороформа, добавляют 1 хлороформного раствора с массовой концентрацией неионогенных СПАВ 10 , 2 раствора ФМК и далее проводят те же операции, что и с пробами. Усреднённое значение холостого опыта вычитают из оптической плотности проб.

Если оптическая плотность пробы выходит за пределы градуировочной зависимости, следует выполнить повторное определение, используя меньшую аликвогу экстракта (от 1 до 3 ), разбавленную хлороформом до 5 .

Анализ каждого экстракта выполняют дважды, полученные оптические плотности усредняют, если расхождение между ними не превышает 25% по отношению к среднему значению при оптической плотности, соответствующей содержанию неионогенных СПАВ 10 мкг и менее, и 20% при более высоких значениях оптической плотности.

В том случае, когда полученное по градуировочной зависимости содержание неионогенных СПАВ составляет 5 мкг или менее, для уточнения результата отбирают 10-15 экстракта в стакан вместимостью 50 и упаривают на водяной бане до объёма примерно 4 . Переносят упаренный экстракт в центрифужную пробирку, доводят объём до 5 , сполоснув стакан хлороформом, и вновь проводят определение.

11.3 Отделение ПЭГ

Если в пробе могут присутствовать ПЭГ, определяющиеся совместно с неионогенными СПАВ, последние отделяют пропусканием экстракта через колонку с силикагелем, подготовленную, как описано в приложении Б. Для этого пипеткой отбирают аликвоту экстракта от 2 до 8 , содержащую в не более 30 мкг неионогенных СПАВ и помещают её в хроматографическую колонку. Вносить пробу в колонку следует осторожно, так, чтобы не взмутить силикагель. Пробу пропускают через колонку со скоростью 0,5-1 /мин. Когда уровень растворителя в колонке достигнет уровня силикагеля, промывают стенки верхней части колонки 0,5-1 хлороформа и также пропускают его через слой силикагеля. Необходимо следить, чтобы уровень растворителя в колонке не опускался ниже уровня силикагеля.

После пропускания пробы в колонку приливают около 10 элюента и также пропускают его со скоростью 0,5-1 . Первые 3 элюата отбрасывают, последующие 4-5 отбирают в центрифужную пробирку и проводят определение неионогенных СПАВ, как описано в 11.2. ПЭГ в этих условиях остаются в колонке.

12 Вычисление и оформление результатов измерений

12.1 По градуировочной зависимости находят содержание неионогенных СПАВ, мкг, во взятой аликвоте экстракта, соответствующее полученному значению оптической плотности.

Массовую концентрацию неионогенных СПАВ в анализируемой пробе воды в пересчете на используемый стандарт X, , рассчитывают по формуле

, (2)

где X - массовая концентрация неионогенных СПАВ в анализируемой пробе, ;

q - содержание неионогенных СПАВ в аликвоте экстракта, найденное по градуировочной зависимости, мкг;

- объём аликвоты экстракта, .

- объем пробы воды, взятый для анализа, .

Массовую концентрацию ПЭГ , , в пересчете на тот же стандарт вычисляют по разности между массовой концентрацией неионогенных СПАВ, найденной до и после пропускания экстракта через колонку с силикагелем.

12.2 Результат измерения в документах, предусматривающих его использование, представляют в виде:

, (Р = 0,95), (3)

где - границы характеристик погрешности результатов измерения для данной массовой концентрации неионогенных СПАВ, (таблица 1).

Численные значения результата измерения должны оканчиваться цифрой того же разряда, что и значения характеристики погрешности.

12.3 Погрешность расчета массовой концентрации ПЭГ , , вычисляют по формуле

(4)

где - значения характеристик погрешности, соответствующие массовой концентрации неионогенных СПАВ, найденной до и после пропускания экстракта через колонку с силикагелем, .

12.4 Допустимо представлять результат в виде:

(P = 0,95) при условии , (5)

где - границы характеристик погрешности результатов измерений, установленные при реализации методики в лаборатории и обеспечиваемые контролем стабильности результатов измерений, .

Примечание - Допустимо характеристику погрешности результатов измерений при внедрении методики в лаборатории устанавливать на основе выражения с последующим уточнением по мере накопления информации в процессе контроля стабильности результатов измерений.

12.5 Результаты измерения оформляют протоколом или записью в журнале, по формам, приведенным в Руководстве по качеству лаборатории.

13 Контроль качества результатов измерений при реализации методики в лаборатории

13.1 Общие положения

13.1.1 Контроль качества результатов измерений при реализации методики в лаборатории предусматривает:

- оперативный контроль исполнителем процедуры выполнения измерений (на основе оценки погрешности при реализации отдельно взятой контрольной процедуры);

- контроль стабильности результатов измерений (на основе контроля стабильности среднеквадратического отклонения повторяемости, среднеквадратического отклонения внутрилабораторной прецизионности, погрешности).

13.1.2 Периодичность оперативного контроля и процедуры контроля стабильности результатов выполнения измерений регламентируют в Руководстве по качеству лаборатории.

13.2 Алгоритм оперативного контроля процедуры выполнения измерений с использованием метода добавок

13.2.1 Контроль исполнителем процедуры выполнения измерений проводят путем сравнения результатов отдельно взятой контрольной процедуры с нормативом контроля К.