Руководящий документ РД 52.10.243-92 "Руководство по химическому анализу морских вод" (утв. решением Комитета по гидрометеорологии и мониторингу окружающей среды от 28 апреля 1992 г.) стр. 67

склянка СПТ - по ГОСТ 25336 ("сухая" склянка Тищенко);

стакан стеклянный вместимостью 250 или 500 мл - по ГОСТ 8682;

чашка фарфоровая выпарительная вместимостью 150 мл - по ГОСТ 9147;

вата стеклянная;

эксикатор диаметром 230 мм или более, например типа II - по ГОСТ 25336;

азот газообразный, ос.ч. - по ГОСТ 9293 или гелий газообразный технический по МРТУ 51-940;

алюминия оксид, ч., для хроматографии - по ТУ 6-09-3916;

силикагель марки АСК - по ГОСТ 3956;

уголь активный, БАУ - по ГОСТ 6217;

пентан, ч. - по ТУ 6-09-3661;

эфир этиловый (серный) для наркоза по Госфармакопее Х, ст. 35;

н-гексан, ч. - по ТУ 6-09-3375;

н-гептан, ч. - по ГОСТ 5395;

натрий сернокислый безводный - по ГОСТ 4166;

натрий хлористый, х.ч. - по ГОСТ 4233;

стандартные вещества:

н-гексадекан, ч. - по ТУ 6-09-3660;

октадекан, ч. - по ТУ 6-09-3005;

трикозан, ч. - по ТУ 6-09-1842;

эйкозан, ч. - по ТУ 6-09-1842.

3. Отбор проб

Пробы НП из разлива на поверхности моря в зависимости от толщины слоя d отбирают: экранным устройством (сетка из нержавеющей стали с ячейками до 1 на раме), например 25х25 см - при мм; устройством (см. п. 2) с пластинами из поглощающих или адгезирующих НП материалов: поролона, тефлона и т.п. - при d = 50...1 мм; способом черпания - при d = 0,5 см и более. Все средства отбора должны быть соответствующим образом подготовлены: промыты гексаном и высушены. Хранить их после этой процедуры следует в чистых полиэтиленовых мешках, предварительно завернутыми в бумагу. Трос (линь), к которому прикрепляют устройства, не должен быть загрязнен каким-либо посторонним НП. При использовании сетчатого пробоотборника смывают с него НП окунанием в гептан, налитый в металлическую ванночку или кювету достаточных размеров. НП с пластиночных устройств можно переносить в такую же ванночку без применения растворителя (образец соскабливают шпателем) либо с помощью гептана. В случае простого черпания НП с поверхности моря использовать ванночку необязательно.

Реперные НП от возможных источников отбирают каким-либо из доступных методов, например из числа описанных выше, как правило, без употребления растворителя.

В среднем масса НП для анализов должна составлять 1-5 г.

Подлежащие идентификации образцы НП или их гептановые растворы помещают в склянки (колбы) с притертыми пробками, удаляют воду пипеткой Пастера (трубка с оттянутым концом). Хотя в закупоренном виде под слоем инертного газа образцы могут сохраняться в холодильнике около полумесяца в неизменном виде, их исследование рекомендуется проводить как можно быстрее по окончании отбора.

4. Подготовка к анализам

4.1. Методы приготовления реактивов для проведения анализов

4.1.1. Оксид алюминия II степени активности готовят дезактивацией добавкой 3% дистиллированной воды к прокаленному при 350-400°С в течение 6 ч реактиву.

4.1.2. Силикагель измельчают до зернистости 40-100 мкм и нагревают в сушильном шкафу 6 ч при 250°С.

4.1.3. Активный уголь высушивают 2 ч при 100-110°С.

4.2. Метод термообработки образцов

Гептановые растворы НП (образцы, отобранные без применения растворителей, растворяют в гептане; концентрация раствора должна быть около 10 мг/мл) высушивают безводным сернокислым натрием, переносят в перегонный аппарат. В горловину насадки вставляют трубку с оттянутым в капилляр концом, касающимся дна колбы, подсоединяют трубку через редуктор к баллону с азотом, гелием, аргоном или углекислым газом. Вместо баллона допускается пользоваться резиновой камерой по ТУ 38-10-6179, наполненной одним из указанных газов. Между редуктором (или камерой) и трубкой устанавливают кран, U-образную трубку с активным углем и склянку Тищенко с нелетучей жидкостью, например с глицерином. Под куб подставляют баню с глицерином или силиконовой жидкостью; температуру в бане, нагреваемой электроплиткой, рекомендуется поддерживать посредством электрореле и контактного термометра. Отгонку гептана ведут в токе газа со скоростью около 5 мл/мин при температуре бани 120°С. Кубовый остаток упаривают в фарфоровой чашке на водяной бане при 80-90°С в течение 10 мин. В итоге этой процедуры получают термообработанный НП.

4.3. Метод осветления образцов

Сильноокрашенные образцы (нефти, мазуты, гудроны и т.п.) для ЖХВД анализа осветляют сорбцией на оксиде алюминия и силикагеле. Процедуру, цель которой заключается в предохранении колонки хроматографа от загрязнения, производят следующим образом. В стеклянную пипетку (см. рис. 27) насыпают оксид алюминия слоем 10 см (около 2 г), затем - силикагель слоем 2 см (около 0,3 г). Боковой отвод пипетки присоединяют через кран к источнику сжатого воздуха, в качестве которого можно использовать микрокомпрессор или наполненную воздухом резиновую камеру; между источником и пипеткой целесообразно сделать ответвление с краном для регулировки давления воздуха в пипетке.

В пипетку наливают смесь пентан - эфир 9:2, закрывают отверстие пробкой, открывают кран и дают растворителю впитаться в сорбент, а избытку стечь. Затем, закрыв кран, вносят в пипетку около 10 мг НП - как такового либо в виде раствора в небольшом количестве гексана. Создают в пипетке давление и дают пробе впитаться в сорбент, после чего хроматографируют сорбат той же смесью пентана и эфира, отбирая 6-8 мл элюата. Упариванием последнего получают "сухой остаток" пробы. Процедуру проводят 2-3 раза, получая таким образом три пробы каждого образца НП.

4.4. Метод выветривания образцов

Реперные НП от возможных источников перед термообработкой дополнительно подвергают искусственному выветриванию. Процедура заключается в следующем. 1-3 г НП помещают на поверхность природной либо искусственной морской воды (30 г поваренной соли на 1 л дистиллированной воды), налитой доверху в эксикатор, включают направленные на образец источник УФ-излучения (ОРК-21), вентилятор и проводят выветривание в течение 4 ч. По окончании процедуры НП переносят с помощью чистого поролонового тампона, зажатого в пинцете, в склянку (колбу), растворяют в гептане и высушивают безводным сульфатом натрия.

5. Проведение анализа

Спектрофлуорометрическому скринингу подвергают непосредственно любые образцы, подготовленные согласно п. 4.2; скринингу методом ЖХВД - только бесцветные или слабоокрашенные НП (например, топлива) либо осветленные образцы; идентификации по методу КГХ - образцы любого типа.

Сравниваемые образцы НП (из разлива и реперный) анализируют в первую очередь методом СФ. В случае выявленного несоответствия образцов (критерии см. п. 8.1) данный реперный образец исключают из рассмотрения и берут другой возможный реперный НП. В случае соответствия сравниваемых НП или при получении неопределенного результата их подвергают скринингу методом ЖХВД, при этом окрашенные НП предварительно осветляют. Результаты скрининга ЖХВД должны подтверждать данные СФ-скрининга. Однако в силу практической недостижимости адекватного выветривания образцов эти результаты могут и расходиться. Критерии соотносимости (соответствия или несоответствия) образцов НП по данным ЖХВД приведены в п. 8.2. Приоритетным следует считать скрининг методом СФ, так как его результаты менее подвержены влиянию степени выветренности анализируемых образцов. Анализ методом КГХ является обязательным этапом идентификации; это означает, что он производится во всех случаях, когда СФ-скринингом установлено соответствие сравниваемых образцов. Критерии соотнесения НП методом КГХ приведены в п. 8.3.

6. Подготовка средств измерений к работе

Подключение к сети, проверку работоспособности, профилактику приборов следует проводить в соответствии с инструкциями по их эксплуатации.

6.1. Спектрофлуорометр

После того как прибор выйдет на режим, устанавливают рабочие условия: и 310 нм; развертка нм со скоростью 25 нм/мин; чувствительность средняя; постоянная времени 1 с; ширина щелей монохроматоров 5 нм; скорость диаграммной ленты 1-2 см/мин. Для измерений служат прямоугольные кварцевые кюветы 1х1х4,5 см. Концентрация аналитических растворов (АР) около 20 мкг/мл.

Для поверки прибора, которая должна производиться не реже одного раза в год, а при необходимости чаще, рекомендуется использовать 3,4-бензпирен. Снимаются спектры возбуждения при нм и спектры эмиссии при нм раствора этого ПАУ в циклогексане или бензоле, концентрация 100 нг/мл. Получаемые спектрофлуорограммы должны в основном соответствовать прилагаемым к прибору спектрам по высоте и положению пиков при идентичных рабочих условиях.

6.2. Жидкостной хроматограф

По выходе прибора на режим устанавливают рабочие условия: расход элюента (гексана в случае силасорба 600 и этанол - аммиак - вода 8:1:1 в случае обращенной фазы) 0,1-0,5 мл/мин; чувствительность средняя; и 254 нм; объем проб - 0,8...5 мкл; скорость самописца - 1 см/мин. Концентрация АР - около 10 мг/мл.

Работоспособность жидкостного хроматографа проверяют один раз в год или чаще (например, при смене колонки) по контрольным растворам аренов, например, о-, м- и п-нитроанилинов по прилагаемой к прибору инструкции. Параметры контрольных хроматограмм (коэффициент разделения, число теоретических тарелок, высота эквивалентной теоретической тарелки) должны соответствовать паспортным данным прибора в пределах . В противном случае прибор подлежит техническому освидетельствованию.

6.3. Газовый хроматограф