9.10 Концентрирование гексановых экстрактов
9.10.1 Если при хроматографировании гексановых экстрактов высота пика менее 10 мм, проводят концентрирование путем испарения гексана из почвенных экстрактов на водяной бане при температуре воды от 40 до 50°С до объема почвенных экстрактов от 5 до 7 мл. Испарение проводят из пробирок вместимостью от 10 до 20 мл или из колб с оттянутым донышком. Дальнейшее испарение проводят при комнатной температуре до объема от 1 до 3 мл.
9.11 Условия хранения реактивов, рабочих и градуировочных растворов и почвенных экстрактов
9.11.1 Реактивы хранят в склянках с притертыми пробками, с наклеенными этикетками, в лабораторном помещении при нормальных условиях (по 8.1).
9.11.2 Рабочие растворы смеси ТБА сернокислого и натрия сернистокислого хранению не подлежат.
9.11.3 Рабочие растворы серной кислоты 50%-й и 1%-й массовой концентрации, аммония хлористого и натрия двууглекислого хранят не более двух недель.
9.11.4 Градуировочные растворы хранят в холодильнике при температуре от 10 до 12°С.
9.11.5 Градуировочные растворы с массовой концентрацией от 100 до 200 мкг/мл хранят не более 1 года.
9.11.6 Градуировочные растворы с массовой концентрацией от 1 до 2 мкг/мл хранят не более 6 мес.
9.11.7 Градуировочные растворы с массовой концентрацией от 0,02 до 0,20 мкг/мл хранят не более 1 мес.
9.11.8 Почвенные экстракты хранят в холодильнике при температуре не более 10°С.
10 Выполнение измерений
10.1 Подготовку к работе хроматографа и кондиционирование колонок проводят в соответствии и техническим описанием и инструкцией по эксплуатации, прилагаемыми к хроматографу.
10.2 Параметры выполнения измерений при использовании колонок длиной 1 или 2 м с различными наполнителями приведены в таблице 2.
Таблица 2
Параметры | Жидкая фаза; длина колонки, м | |||
SE-30; 1 | OV-17; 1 | ХЕ-60; 1 | ХЕ-60; 2 | |
| Скорость протяжки ленты,мм/мин | 10 | 10 | 10 | 10 |
| Рабочие шкалы электрометра, А |  |  |  | Для БИД- |
 |  |  |  | |
 |  |  | ||
 |  |  | делитель 32 | |
Расход газа- носителя (азота),  : | ||||
| через колонку | От 50 до 60 | От 50 до 60 | От 50 до 60 | От 32 до 36 |
| через детектор | От 40 до 80 | От 40 до 80 | От 40 до 80 | От 70 до 100 |
| Температура, С: | - | |||
| колонки испарителя детектора | От 200 до 210 | От 200 до 210 | От 190 до 210 | От 210 до 215 |
От 220 до 230 | От 220 до 230 | От 210 до 230 | От 230 до 240 | |
От 240 до 250 | От 240 до 250 | От 240 до 250 | От 270 до 300 | |
| * Для хроматографа "Цвет- 550". | ||||
10.3 Абсолютное и относительное время удерживания пестицидов при указанных в таблице 2 параметрах приведены в таблице 3.
Таблица 3
Наименование пестицида | Жидкая фаза; длина колонки, м | |||||
ХЕ-60; 2 | SK-30; 1 | ХЕ-60; 1 | ||||
Абсолютное значение, мин | Относительно к ДДЭ | Абсолютное значение, мин | Относительно к ДДЭ | Абсолютное значение, мин | Относительно к ДДЭ | |
| Трнфлуралин | 1,80 | 0,28 | 1,3 | 0,23 | 0,8 | 0,18 |
| Альфа-ГХЦГ | 2,35 | 0,37 | 1,5 | 0,22 | 1,3 | 0,29 |
| Гамма-ГХЦГ | 3,08 | 0,48 | 1,8 | 0,26 | 1,8 | 0,41 |
| n, n'-ДДЭ | 6,40 | 1,00 | 6,8 | 1,00 | 4,4 | 1,00 |
| n, n'-ДДТ | 13,43 | 2,10 | 11,4 | 1,73 | 9,4 | 2,13 |
| * Для хроматографа "Цвет-500". | ||||||
10.4 Перед новой партией проб или при замене растворителя проводят по [7]:
- бланковое (холостое) определение (проверку чистоты реактивов), включающее все операции анализа и реактивы, используемые в ходе анализа;
- установление линейного диапазона детектирования (ЛДД), т.е. линейной зависимости аналитического сигнала от количества пестицида, введенного в хроматограф, для каждого измеряемого пестицида;
- при отсутствии ЛДД проводят построение градуировачного графика зависимости аналитического сигнала от количества пестицида, введенного в хроматограф.
10.5 В хроматограф вводят 2 мкл растворителя для проверки чистоты колонки.
10.6 В хроматограф вводят аликвоту градуировочного раствора.
10.7 В хроматограф вводят аликвоту гексанового экстракта анализируемой пробы. Для получения достоверного результата измерения каждый испытуемый раствор хроматографируют три раза. При расчетах используют значение, являющееся средним арифметическим из трех измерений.
10.8 Объем аликвоты гексанового экстракта анализируемой пробы, введенный в хроматограф, должен быть не менее 4 мкл при использования микрошприца вместимостью 10 мкл и не менее 1 мкл при использовании микрошприца вместимостью 1 мкл и быть равным объему аликвоты градуировочного раствора.
10.9 Возникающие после введения испытуемых растворов аналитические сигналы регистрируются потенциометром, автоматически обрабатываются и записываются в виде графического изображения - пика (далее хроматограмма) на ленте регистратором, входящим в комплект хроматографа.
10.10 В качестве расчетного параметра при обработке хроматограммы используется высота пика сигнала, которая должна быть не менее 10 мм.
10.11 При высоте пика менее 10 мм выполняют операции по 9.10.
10.12 Выявление и устранение мешающего влияния химических веществ, присутствующих в реактивах, в фильтровальной бумаге, на стенках стеклянной посуды, проводят по [7].
10.13 Из мешающих коэкстрактивных веществ, определяемых детектором типа электронного захвата, устраняют влияние хлорорганических и фосфорорганических пестицидов, серы и сероорганических соединений. Время удерживания этих веществ, по отношению к времени удерживания n, n'-ДДЭ (относительное время), с применением колонок длиной 1 м и фаз SE-30 и ХЕ-60 приведено в таблицах 4 и 5 соответственно.
Таблица 4
Наименование коэкстрактивных веществ | Относительное время удерживания |
| Диметилфталат | 0,07 |
| Альфа-ГХЦГ, трифлуралин (трефлан), диметоат (фосфамид), гексахлорбензол | От 0,19 до 0,23 |
| Гексахлорбензол, гамма-ГХЦГ, бета-ГХЦГ, диазинон (базудин), эндосульфан (эфир-тиодан) | От 0,24 до 0,28 |
| Сера, гексахлорпараксилол, пентахлорбензол | От 0,35 до 0,40 |
| Метафос | От 0,43 до 0,48 |
| Дибутилфталат | 0,45 |
| Актеллик, альдрин, дилор, гептахлор, карбофос, дикофол (кельтан), фенхлорфос (тролен, трихлорметафос-3), сера, пентахлорнитробензол | От 0,53 до 0,67 |
| Метил-2-этилгексилфталат | 0,59 |
| Эндосульфан (лактонтиодан, альфа-тиодан) | От 0,70 до 0,76 |
| Эпоксигептахлор | От 0,83 до 0,88 |
| Ди-2-хлорэтилфталат, дигексилфталат, n, n'-ДДЭ, эндосульфан (бета-тиодан), дильдрин, компонент ПХБ | От 0,98 до 1,10 |
| n, n'-ДДТ, n, n'-ДДТ | От 1,38 до 1,52 |
| n, n'-ДДТ, эндосульфан (тиодансульфат), компонент ПХБ | От 1,55 до 1,81 |
| Примечание - В скобках приведены наименования пестицидов и химических веществ по [8, 9]. | |
Таблица 5
Наименование коэкстрактивных веществ | Относительное время удерживания |
| Гексахлорбензол, сера, гексахлорпараксилол, галовакс | От 0,14 до 0,17 |
| Трифлуралин (трефлан) | От 0,18 до 0,23 |
| Альфа-ГХЦГ, компонент галовакса, серы, ПХБ, гептахлор | От 0,29 до 0,33 |
| Гамма-ТХЦГ, дибутилфталат, дилор, альдрин, компоненты галовакса и ПХБ | От 0,39 до 0,45 |
| Фенхлорфос (тролен, трихлорметафос-3) | От 0,5 до 0,6 |
| Компоненты ПХБ и галовакса | От 0,6 до 0,7 |
| Карбофос, днкофол (кельтан), октаметил (омайт) | От 0,8 до 0,9 |
| n, n'-ДДЭ, бета-ГХЦГ | 1,0 |
| Метафос | 1,05 |
| n, n'-ДДТ, бета-ГХЦГ, компонент ПХБ | От 1,10 до 1,20 |
| Диметоат (фосфамид), фенитротион (метатион, ме-(тилнитрофос), компоненты ПХБ и галовакса | От 1,25 до 1,35 |
| n, n'-ДДТ, компонент ПХБ | От 2,1 до 2,4 |
| n, n'-ДДД | От 2,5 до 2,6 |
| Примечание - В скобках приведены наименования пестицидов и химических веществ по [8, 9]. | |
10.13.1 Выявление и устранение влияния хлорорганических пестицидов производят при использовании колонок различной полярности с учетом следующих факторов:
- при работе с двумя колонками можно разделить измеряемые пестициды, а также установить наличие в анализируемой пробе гексахлорбензола, дилора и бета-ГХЦГ;
- на колонке с фазой SE-30 на определение гамма-ГХЦГ мешающее влияние оказывает бета-ГХЦГ (одинаковое время удерживания);
- на колонке с фазой ХЕ-60 мешающее влияние на определение n, n'-ДДЭ и гамма-ГХЦГ оказывают, соответственно, бета-ГХЦГ и дилор (близкие значения времени удерживания). Примеры хроматограмм, полученных с использованием фаз SE-30 и ХЕ-60 при разной длине колонок, приведены на рисунках 5, 6, 7.
10.13.2 Устранение мешающего влияния фосфорорганических пестицидов диметоата, диазинона, актеллика, пентахлор-нитробензола, метафоса, определяемых с помощью детектора типа электронного захвата, производят очисткой экстрактов серной кислотой по 9.7.
10.13.3 Устранение мешающего влияния серы и сероорганических соединений проводят по 9.8.2.
10.13.4 Устранение мешающего влияния других веществ, таких, как галовакс, полихлорбифенилы, терфенилы, полихлорнафталины, гексахлорпараксилол, проводят по 9.8.3.
11 Обработка и оформление результатов измерений
11.1 Формой получения результатов измерений является хроматограмма, которая записывается и хранится на бумажном носителе.
11.1.1 Результаты измерений после обработки хроматограммы и проведения расчетов по 11.2-11.5 записывают в рабочий журнал по форме, представленной в приложении А.
11.2 Наличие пестицидов в почвенном экстракте определяют по времени удерживания, устанавливаемому с помощью градуировочного раствора.