Отрицательные контрольные образцы должны испытываться при заданных условиях выдержки в отдельной камере без образцов, зараженных суспензией спор грибов. Для того чтобы исключить всякий рост плесневых грибов на отрицательном контрольном образце, камера должна быть стерилизована одним из методов, приведенных в п.D2 приложения D. Данное испытание считается недействительным, когда плесневые грибы развиваются как на испытуемых, так и на отрицательных контрольных образцах.
9.2.Заражение споровой суспензией
Заражение споровой суспензией как испытуемых, так и контрольных образцов (см. п.4.2) должно осуществляться распылением, нанесением кистью или погружением в нее образцов в зависимости от размера и свойств образцов (см. приложения В и С).
Отрицательные контрольные образцы должны пройти обработку дистиллированной водой распылением, нанесением кистью, погружением в воду и должны быть защищены от загрязнения.
9.3.Выдержка
9.3.1.В течение 15 мин с момента заражения в соответствии с п.9.2 испытуемые образцы небольших размеров должны быть распределены по группам, в каждой из которых должно быть по три контрольные полоски, которые могут быть размещены в контейнеры (см. п.5.1.2).
Образцы и полоски должны быть размещены на достаточном расстоянии друг от друга, и контейнеры должны быть помещены в испытательную камеру (см. п.5.1.2).
9.3.2.В случаях, когда это возможно, отрицательные контрольные образцы следует размещать, как и испытуемые образцы, в аналогичные отдельные контейнеры (без заражения контрольных полосок). Затем контейнеры следует поместить в испытательную камеру (см. п.5.1.2).
9.3.3.В случае испытания образцов больших размеров следует помещать в одну камеру с ними по три контрольные полоски. Любые отрицательные контрольные образцы должны проходить выдержку предпочтительно в отдельной камере; если выдержка проходит в той же камере, где завершилось испытание на грибостойкость, то ее осуществляют сразу после обеззараживания (см. приложение D).
9.3.4.Крышки контейнеров нельзя ни открывать, ни двигать каким-либо образом; можно приоткрывать крышки на несколько минут по истечении семи дней для осмотра контрольных полосок, чтобы убедиться в жизнеспособности спор и для пополнения запасов кислорода. Эта операция должна повторяться каждые семь дней до тех пор, пока не истечет установленное время выдержки.
9.3.5.Если спустя семь дней после заражения ни на одной контрольной полоске нельзя обнаружить развитие грибов, то испытание считается недействительным и его следует повторить.
10.ЗАКЛЮЧИТЕЛЬНЫЙ КОНТРОЛЬ
10.1.Внешний осмотр
10.1.1.Сразу же после изъятия образцы подвергают осмотру (см. п.10.3), измерениям и (или) фотографированию (если это требуется в соответствующей НТД), так как грибы быстро меняют свой внешний вид под воздействием сухой атмосферы воздуха лаборатории (см. приложение С по рекомендуемым мерам безопасности при проведении испытаний).
10.1.2.После осмотра и определения степени развития грибов мицелий их осторожно смывают с поверхности, которую затем осматривают под микроскопом, определяя характер и степень изменения физических свойств (например, травление) образца (см. приложение С по рекомендуемым методам промывки, безопасным для здоровья человека).
10.2.Воздействие грибов
10.2.1.Если в соответствующей НТД предусматривается проведение после выдержки измерений электрических параметров и (или) проверка механических свойств в условиях влажности, то необходимо, чтобы относительная влажность воздуха чрезмерно не изменялась, пока эти измерения и проверка не завершатся. Поэтому такие измерения на образцах небольшого размера следует проводить в контейнере с закрытой крышкой, в которой еще содержится некоторое количество воды. Измерения на крупных образцах проводят, когда образцы еще находятся в камере влажности.
Примечание. В случае проведения работ с образцами под электрической нагрузкой или при открытых крышках контейнеров и дверцах камер влажности персонал должен соблюдать надлежащие меры безопасности (см. приложение С, включающее рекомендуемые меры безопасности при проведении испытаний).
10.2.2.Если в соответствующей НТД предусматривается проведение измерений и проверка после восстановления, то образцы извлекают из контейнера или камеры, проводят внешний осмотр в соответствии с п.10.1.1 и затем помещают в заданные условия восстановления на 24 ч, после чего проводят измерения.
10.2.3.Проводят аналогичные измерения образцов, обработанных только водой. Считается, что сколько-нибудь существенная разница в результатах измерений обеих групп обусловлена воздействием плесневых грибов в сочетании с повышенной влажностью.
10.2.4.После проведения измерения образцы извлекают из камеры, подвергают внешнему осмотру в соответствии с п.10.1.1 и определяют окончательную степень воздействия плесневых грибов на образцы в соответствии с п.10.1.2.
10.3.Интенсивность развития грибов
Прошедшие выдержку испытательные образцы должны быть сначала осмотрены невооруженным глазом, а затем, в случае необходимости, под стереоскопическим микроскопом (с номинальным, примерно 50-кратным увеличением).
Интенсивность развития плесневых грибов оценивается и выражается в соответствии со следующей шкалой:
0 баллов - плесневых грибов не видно при номинальном, примерно 50-кратном увеличении;
1 балл - плесневых грибов не видно или едва видно невооруженным глазом, но ясно видно под микроскопом;
2 балла - плесневые грибы отчетливо видны невооруженным глазом, но покрывают менее 25% испытуемой поверхности;
3 балла - плесневые грибы отчетливо видны невооруженным глазом и покрывают более 25% испытуемой поверхности.
Примечание. В случае, если образцы состоят из нескольких узлов с разной степенью развития плесневых грибов, то грибостойкость каждого узла должна оцениваться отдельно. Для варианта 2 испытания нулевой балл оценки степени развития плесневых грибов должен задаваться только тогда, когда требуется выявить фунгицидное действие.
11.СВЕДЕНИЯ, КОТОРЫЕ СЛЕДУЕТ УКАЗЫВАТЬ В СООТВЕТСТВУЮЩЕЙ НТД
Если данное испытание включено в соответствующую НТД, то должны быть указаны следующие данные:
| Номер раздела, пункта | |
| а) Вариант 1 и 2 испытания | 3 |
| б) Степень жесткости, длительность испытания | 6 |
| в) Измерение электрических характеристик и проверка механических свойств изделия перед выдержкой (только в том случае, если требуется определить ухудшение рабочих характеристик изделия) | 7 |
| г) Предварительная обработка | 8 |
| д) Выдержка | 9 |
| е) Измерение электрических характеристик и проверка механических свойств изделия после выдержки (только в том случае, если требуется определить ухудшение рабочих характеристик изделия) | 10.1, 10.2, 10.3 |
| ж) Требуется ли проведение внешнего осмотра изделий, измерений, проверок и (или) фотографирования | 10.1.1 |
| з) Проводятся ли измерения электрических характеристик и проверка механических свойств изделий, если они необходимы, после восстановления или при тех и других условиях вместе | 10.2.1 |
| и) Измерения и проверки после восстановления | 10.2.2 |
ПРИЛОЖЕНИЕ А Справочное. ВРЕДНЫЕ ВОЗДЕЙСТВИЯ НА ПЕРСОНАЛ
А1. Общие сведения
А1.1. По мнению микологов и патологов, проведение испытания на грибостойкость может представлять опасность для здоровья персонала, проводящего испытание, если не принимать особых мер предосторожности.
А1.2. Приведенные в данных приложениях меры предосторожности основаны на знании микробиологических методов и навыков работы со специальной аппаратурой, поэтому персоналу, занятому проведением таких испытаний, необходимо иметь достаточную квалификацию по применению методов и эксплуатации оборудования.
А1.3 Для проведения испытания на грибостойкость рекомендуется выделить отдельное помещение.
А1.4. Рекомендуется использовать микробиологический вытяжной шкаф (МВШ) для проведения отдельных этапов испытания при работе с чистыми культурами плесневых грибов, включая их проверку при получении от поставщика.
А1.5. Разносимые воздухом споры грибов непрерывно поступают в организм человека через рот и нос, но обычно серьезной опасности для здоровья человека не представляют. Однако повторное вдыхание некоторых видов грибов, в том числе и используемых при испытаниях на грибостойкость, может вызвать реакцию у некоторых индивидумов с повышенной чувствительностью, поэтому особое внимание следует обратить на меры предосторожности, которые должны выполняться персоналом при проведении испытания. Эти меры изложены в приложении С.
Кроме того, во время выдержки в испытательной камере могут прорасти и развиваться посторонние виды плесневых грибов, попавшие случайно; некоторые представители местной микрофлоры могут оказаться вредными для человеческого организма.
А1.6. Всем лицам, включенным в группу по проведению данного испытания, рекомендуется приступить к работе со спорами грибов только с разрешения врача, дающего заключение о состоянии здоровья и разрешение на участие в проведении испытания.
А1.7. Весь персонал, занятый проведением испытания, должен быть уведомлен о возможной опасности, которой он может подвергаться. Подобные случаи могут быть предусмотрены законодательством по технике безопасности.
А2. Инструкции медицинскому персоналу предприятия
А2.1. Указанное испытание J опасно для персонала, занятого его проведением. Споры могут попасть в организм при вдыхании, проглатывании или путем внедрения через порезы, ссадины и т.д.
А2.2. Меры безопасности и гигиены труда при испытаниях, которые должны соблюдаться персоналом, приведены в приложении С; их целью является сведение к минимуму опасности заражения.
А2.3. Особая опасность заражения существует для лиц с повышенной чувствительностью, а именно:
а)для лиц, которые обычно отличаются повышенной чувствительностью к пыльце, домашней пыли, перхоти животных и т.п. и страдают насморками, астмой или проявляют другие аллергические симптомы. Опасность в данном случае в развитии аллергии по I типу к спорам плесневых грибов, но в определенных обстоятельствах могут развиваться реакции по III типу (профессиональное заболевание легких у работников сельского хозяйства);
б)для лиц, имеющих хроническое заболевание легких, например бронхоэктазию, хронический бронхит, саркоид, эмфизему и т.п., накопление спор плесневых грибов в полостях легких может привести к прорастанию и развитию главным образом Aspergillus fumigatus в виде грибного шара или аспергилломы. Замеченные туберкулезные поражения являются возможным местом прорастания спор и роста плесневых грибов;
в)для больных, проходящих в данный момент лечение антибиотиками широкого спектра действия, получающих лекарства, которые подавляют иммунную систему организма, включая кортикостероиды, принимающих другие предписанные им химико-терапевтические препараты, так как нарушение нормальной бактериальной флоры дыхательного и аллиментарного трактов иногда позволяет грибам развиваться обширно, а подавление иммунной системы может еще более повысить восприимчивость организма к грибной инфекции.
Хотя опасность заражения спорами грибов при проведении испытания считается небольшой, вовлекать в его проведение лиц, попадающих под вышеуказанные категории, не рекомендуется.