В круглодонную колбу вместимостью 2 л вносят 10 г хлористого натрия, 10 г мочевины, 1 г глюкозы и 4 мл ацетона (табл. 8). Приливают 500 мл воды и перемешивают до полного растворения солей. Микропипеткой вносят 0,2 мл цельной крови, 0,8 г белка сыворотки крови. Для расчета необходимого количества сыворотки используют формулу:
100 x 0,8
объем = ─────────────────────────────────────────────────
сыворотки содержание белка в используемой сыворотке
Например, если используемая сыворотка содержит 7,5 г/л общего белка, то объем сыворотки, содержащей 0,8 г белка, будет равен:
100 x 0,8
───────────── = 10,7 мл.
7,5
Затем доводят объем дистиллированной водой до 2 л и хорошо перемешивают. Для консервации в полученный раствор добавляют 5 мл хлороформа.
3.1.5. Условия хранения, срок годности.
Раствор хранят при комнатной температуре в посуде с притертой пробкой.
Срок годности - около года.
Таблица 8.
Перечень добавляемых веществ и их концентрация в конечном растворе
┌─────────────────────────┬────────────────────┬────────────────────────┐
│ │ Добавляемое │ Концентрация вещества │
│ Вещество │ количество │в контрольном растворе │
│ │ вещества │ │
├─────────────────────────┼────────────────────┼────────────────────────┤
│NaCl │ 10,0 г │ - │
│Мочевина │ 10,0 г │ 83 ммоль/л │
│Глюкоза │ 1,0 г │ 2,775 ммоль/л │
│Белок │ 0,8 г │ 0,4 г/л │
│Гемоглобин │ 200 мкл │ полож. │
│(скрытая кровь) │ │ │
│Ацетон │ 4 мл │ полож. │
└─────────────────────────┴────────────────────┴────────────────────────┘
┌─────────────────────────┬────────────────────┬────────────────────────┐
3.2. Контрольный раствор N 2.
3.2.1. Назначение.
Применяется в качестве контрольного материала для контроля качества исследований химического состава и микроскопического исследования осадка мочи.
3.2.2. Реактивы.
1. Калий фосфорнокислый однозамещенный (KH2PO4), хч, 0,37 моль/л.
2. Натрий фосфорнокислый двузамещенный (Na2HPO4 x 7 H2O), чда, 0,19 моль/л.
3. Сыворотка крови с нормальным содержанием белка.
4. D (+) - Глюкоза, безводная, ч, чда.
5. Ацетон, ч, чда.
6. Гемолизат. К эритроцитарной массе добавляют равный объем дистиллированной воды и тщательно перемешивают.
7. Фиксированные эритроциты.
8. Фиксированные лейкоциты светлого слоя кровяного сгустка.
9. Фиксированные непатогенные Е. coli.
10. Фиксированные клетки дрожжей.
11. Фиксированные сперматозоиды.
12. Кристаллы цистина. Получают путем перекристаллизации из химически чистого порошка L-цистина.
13. Кристаллы триппельфосфатов. Получают из осадков проб мочи больных.
14. Кристаллы оксалата кальция. Получают из осадков проб мочи больных.
15. Натрий хлористый, ч, чда, хч, 145 ммоль/л.
16. Формалин, фарм.
3.2.3. Методы исследования.
Используют методы исследования химического и микроскопического состава мочи.
3.2.4. Способы приготовления.
В мерную колбу на 100 мл вносят: 12,2 мл KH2PO4, 11,6 мл NaHPO4 x 7 H2O, 5 мл сыворотки крови с нормальным содержанием белка, 1,0 г глюкозы, 0,5 мл ацетона, 0,1 мл гемолизата и доливают дистиллированной водой до метки. Перемешивают до полного растворения и замораживают.
Для получения осадка в контрольный раствор добавляют соответствующие компоненты, которые предварительно фиксируют.
Метод фиксации.
Каждый компонент, добавляемый для образования осадка, промывают в холодном физиологическом растворе и смешивают с раствором водного формалина с физиологическим раствором (10,0 мл формалина + 0,85 г NaCl и доливают дистиллированной водой до 100,0 мл). Фиксацию проводят в течение 12 час.
В контрольный раствор добавляют от 1,0 мл до 5,0 мл фиксированного материала.
3.2.5. Условия хранения, срок годности.
Контрольный раствор хранят при -20 град.С.
Срок хранения - до 3 месяцев.
3.3. Контрольный материал N 3.
3.3.1. Назначение.
Используют для контроля качества диагностических полосок.